研究課題
骨髄異形成症候群白血病転化細胞株MDS-Lと培養急性骨髄性白血病細胞株HL-60を用いてin vitroにおいて以下の実験結果を得た。①最終年度においてMDS-Lを脱メチル化薬デシタビン長期培養によりWestern blotにてBCL-2発現低下、TP53発現増強、更に、PT53AIP1・TP53/11発現増加、TP53分解酵素MDM2発現減少が得られた。これによりBCL-2阻害薬venetoclaxとデシタビンの相乗効果が得られた。更に、別の抗アポトーシス分子Mcl-1阻害薬を複数(Alvocidi、S64315、AZD5991)を検討し、S64315併用によりvenetoclax、デシタビンとの併用効果が得られた。②HL-60はCD33陽性率70%であり、CD33抗体薬Aの効果を検討した。一昨年Aが白血病細胞にADCC活性を有する事を証明した。昨年抗体薬Aを48時間共培養しAnnexin陽性率からアポトーシス死を誘導し更にWestern blotにて内因系アポトーシスタンパクcaspase 9, 3, 7だけでなく外因系アポトーシスタンパクcaspase 8の切断・活性化が生じたことを示した。さらに最終年度venetoclaxとの併用によりアポトーシス死が増強することを示した。このように抗体薬Aが免疫担当細胞存在下に白血病細胞内因系、外因系双方を活性化させ、さらにBcl-2阻害により併用効果を発揮した事を明らかにした。③最重要の抗白血病薬シタラビンは耐性細胞では細胞内に薬剤が転入されない。venetoclaxとの併用でも耐性細胞にて殺細胞効果は増強されなかった。最終年度新規リポ化シタラビン製剤Bはシタラビンと異なる経路で薬剤が細胞内に転入され、殺細胞効果を発揮した。以上、本研究はエピゲノム標的、アポトーシス抵抗性解除、新規薬剤が新たなる治療戦略となる基礎基盤を示した。
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