補体に着目した小児血管炎の病態解明と新規治療法としての抗補体療法の可能性の検討

2021 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 21K07853
• 研究機関: 横浜市立大学
• 研究代表者: 伊藤 秀一 横浜市立大学, 医学研究科, 教授 (20336572)
• 研究分担者: 松田 明生 国立研究開発法人国立成育医療研究センター, 免疫アレルギー・感染研究部, 室長 (10359705)
• 研究期間 (年度): 2021-04-01 – 2024-03-31
• キーワード: 川崎病 / IgA血管炎 / 血管炎 / 補体 / 好中球 / C5 / Netosis

研究実績の概要

本研究は川崎病（KD）患者やIgA血管炎患者における補体と自然免疫細胞の相互作用、重症度や予後との相関、最終的には抗補体薬が新規治療薬候補になりうるか検討することを目的としている。先行研究において急性期KD患者の血液中においてC5b-9、C5a、Baが上昇していた。今年度は好中球の複数の表面抗原測定、NETosis評価に関し、条件検討を行った。
川崎病の新規発症患者2名、IgA血管炎患者1名、および当院へ転院した川崎病不応例5症例の白血球表面抗原、NETosis誘導、活性酸素の評価を行ったところ、急性期にはC5a受容体の変化、および活性酸素の上昇を認めた。このことから急性期にC5aが好中球活性化に関与している可能性が示唆された。
さらに健常者の末梢血多核球（ＰＭＮ）を分離し、rC5aおよびTNF-α、IL-1βなどのサイトカインで刺激を行い、表面抗原の変化を確認したところ、単独での刺激と比較して、rC5aとその他のサイトカインで同時に刺激すると、好中球の表面抗原変化がより強く惹起されることが観察された。また、KDの血管内皮細胞モデルを用いて、血管内皮細胞をrC5aで刺激し、受容体変化や炎症の惹起について検討したが、こちらは明らかな変化を認めなかった。

現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

好中球表面の様々な抗原測定法、NETosis評価法にやや不安定な部分があるため、好中球の分離法や培養方法を工夫、検討している。昨年度は、北海道大学大学院保健科学研究院病態解析学分野　病理・免疫検査学研究室(石津明洋教授）のラボにて、検査技術の習得・改善のための技術研修も行った。一方で、新型コロナウイルス感染症の流行に伴い、感染症が減少し、その結果川崎病新規発症患者の発生が少ないため、患者登録数を十分得ることが出来ていない。今後。積極的にリクルートを推進する必要がある。

今後の研究の推進方策

次年度は表面抗原、活性酸素能に加え、細胞死(NETosis)の評価法を確立し、患者検体を増やして検討を行っていく。また、抗補体薬を添加したときの変化も検討していく。

次年度使用額が生じた理由

2022年度も、研究費は解析のための消耗品を中心に使用予定である。

研究成果

• [雑誌論文] A case of Multisystem inflammatory syndrome in children in a Japanese boy: with Discussion of cytokine profile. (2021)
  • 著者名/発表者名: Fukuda S, Kaneta M, Miyake M, Ohya T, Miyakawa K, Iwamoto M, Ito S
  • 雑誌名: Mod Rheumatol Case Rep 巻: 5 ページ: 442-447
  • DOI: 10.1080/24725625.2021.1920140.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Exposures associated with the onset of Kawasaki disease in infancy from the Japan Environment and Children’s Study (2021)
  • 著者名/発表者名: Fukuda S, Kaneta M, Miyake M, Ohya T, Miyakawa K, Iwamoto M, Ito S
  • 雑誌名: Scientific Reports 巻: 11 ページ: 13309-13309
  • DOI: 10.1038/s41598-021-92669-z
  • 査読あり
• [雑誌論文] Genetic and chemical inhibition of IRF5 suppresses pre-existing mouse lupus-like disease (2021)
  • 著者名/発表者名: Ban T, Kikuchi M, Sato Go, Manabe A, Tagata N, Harita K, Nishiyama A, Nishimura K, Yoshimi R, Kirino Y, YanaiH, Matsumoto Y, Suzuki S, Hihara H, Ito M, Tsukahara K, Yoshimatsu K, Yamamoto T, Taniguchi T, Nakajima H, Ito S, Tamura T
  • 雑誌名: Nature Communications 巻: 12 ページ: 4379
  • DOI: 10.1038/s41467-021-24609-4
  • 査読あり
• [雑誌論文] Associations between prenatal exposure to volatile organic compounds and neurodevelopment in 12-month-old children: The Japan Environment and Children's Study (JECS) (2021)
  • 著者名/発表者名: Nakaoka H, Hisada A, Matsuzawa D, Yamamoto M, Mori C, Japan Environment and Children's Study (JECS) Group, Kamijima M, Yamazaki S, Ohya Y, Kishi R, Yaegashi N, Hashimoto K, Mori C, Ito S, Yamagata Z, Inadera H, Nakakayama T, Iso H, Shima M, Kurozawa Y, Suganuma N, Kusuhara K, Katoh T
  • 雑誌名: Science of The Total Environment 巻: 794 ページ: 148643～148643
  • DOI: 10.1016/j.scitotenv.2021.148643
  • 査読あり
• [雑誌論文] Ultrasonography as a Diagnostic Support Tool for Childhood Takayasu Arteritis Referred to as Fever of Unknown Origin: Case Series and Literature Review (2021)
  • 著者名/発表者名: Nozawa H, Ogura M, Miyasaka M, Suzuki H, Ishikura K, Ishiguro A ，Ito S
  • 雑誌名: JMA Journal 巻: 4 ページ: 358-366
  • DOI: 10.31662/jmaj.2020-0115
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] 【おさえておきたい川崎病ガイドラインのツボ】血漿交換． (2021)
  • 著者名/発表者名: 伊藤秀一
  • 雑誌名: 小児科診療 巻: 84 ページ: 1181-1186
• [雑誌論文] 【小児疾患診療の為の病態生理 ２改正版６版】小児疾患リウマチ性疾患とその周辺の疾患マクロファージ活性症候群． (2021)
  • 著者名/発表者名: 伊藤秀一
  • 雑誌名: 小児内科 巻: 53 ページ: 950-955
• [学会発表] Impact of SARS-CoV-2 pandemic on the incidence of Kawasaki disease and epidemic infections The 13th International Kawasaki Disease Symposium (2021)
  • 著者名/発表者名: Ito S, Shimizu H, Fukuda S, Sasaki K, Sakuma H, Kamiyama Y, Kobayashi T
  • 学会等名: The 13th International Kawasaki Disease Symposium
  • 国際学会
• [学会発表] 小児血管炎治療における生物学的製剤・分子標的薬の役割 (2021)
  • 著者名/発表者名: 伊藤秀一
  • 学会等名: 第41回日本川崎病学会総会・学術集会
  • 招待講演
• [学会発表] SARS-COV-2パンデミックが川崎病および流行性感染症の発症率に与える影響 (2021)
  • 著者名/発表者名: 伊藤秀一, 福田清香, 村瀬絢子, 伊藤育容, 神山裕二, 伊藤 淳, 咲間裕之, 小林 徹
  • 学会等名: 第41回日本川崎病学会総会・学術集会
• [学会発表] 川崎病の過去と未来－故川崎富作先生の業績と残された課題 (2021)
  • 著者名/発表者名: 伊藤秀一
  • 学会等名: 第46回東日本小児科学会，
• [学会発表] 川崎病-川崎富作先生の業績と未来への展望 (2021)
  • 著者名/発表者名: 伊藤秀一
  • 学会等名: 第65回日本リウマチ学会学術集会
• [学会発表] Screening for novel drug candidates for treatment of IVIG-resistant Kawasaki Disease (2021)
  • 著者名/発表者名: Akio Matsuda, Shokei Murakami, Takashi Inoue, Kenji Matsumoto
  • 学会等名: The 13th International Kawasaki Disease Symposium
• [学会発表] 松田明生、村上将啓、井上隆志、伊藤育容、阿部淳、伊藤秀一、松本健治 培養冠動脈血管内皮細胞のバイオロジーから川崎病の病態メカニズム、新しい治療戦略を考える (2021)
  • 著者名/発表者名: 松田明生、村上将啓、井上隆志、伊藤育容、阿部淳、伊藤秀一、松本健治
  • 学会等名: 第41回日本川崎病学会、
  • 招待講演
• [図書] 川崎病学 改訂第2版 (2021)
  • 著者名/発表者名: 日本川崎病学会
  • 総ページ数: 268
  • 出版者: 診断と治療社
  • ISBN: 9784787824820