ヒストン脱メチル化酵素阻害剤による膵管癌に対する新たな腫瘍免疫療法の開発

2021 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 21K07882
• 研究機関: 北海道大学
• 研究代表者: 川久保 和道 北海道大学, 大学病院, 特任助教 (80633578)
• 研究期間 (年度): 2021-04-01 – 2024-03-31
• キーワード: 腫瘍免疫 / Epigenetics / ヒストン脱メチル化酵素 / 膵癌

研究実績の概要

膵癌細胞株を用いて、各種KDM5阻害剤を用いて、Cell viability assay、H3K4me3の総発現量の変化を明らかにした。研究協力者より、新たなKDM5阻害剤を提供いただき、既存のKDM阻害剤と比較して、殺細胞効果が高いことが明らかになった。癌細胞のデータベースから、各種KDM５発現量とKDM5阻害剤の相関を調べて、さらに、siRNAを用いて、KDM5A、KDM５B、KDM5C、KDM５Dのノックダウンを行い、KDM5阻害剤の感受性がどのように変化しているのかを、明らかにした。
癌細胞のデータベースを用いて、膵癌細胞株のPDL1の発現量を調べ、リアルタイムPCR法にて確認をおこなった。さらに、膵癌細胞株における、PDL1の発現量を、real time PCRにて確認、各種KDM5阻害剤により、どのように変化するのかを明らかにした。
膵癌細胞株における、ベースラインのH3K4me3発現量を、ウェスタンブロッティング法により明らかにした。
癌細胞のデータベースを用いて、膵癌細胞株において、KDM５阻害剤に関連のありそうな遺伝子変異を抽出し、KDM5阻害剤の、感受性に関わると思われる、遺伝子変異の有無につき、ダイレクトシーケンス法にて確認した。
今後は、膵癌細胞株に対し、KDM5阻害剤による、および、KDM５をshRNAによりノックダウンしたものの、RNAシーケンシングを行い、KDM5阻害剤による殺細胞効果、腫瘍免疫への影響のメカニズムを明らかにする。

現在までの達成度 (区分)

4: 遅れている

理由

膵癌細胞の、輸入に時間を要している。

今後の研究の推進方策

KDM5阻害剤により、どのような遺伝子発現が変化するのかを、RNAシーケンス、および、ChiPシーケンスにて明らかにする。
PDL1以外の、腫瘍免疫に関わるタンパクにつき、検討していく。

次年度使用額が生じた理由

RNAシーケンスなど、NGS解析を行わなかった。 次年度に、RNAシーケンシング、ChiPシーケンシングを行う予定である。

研究成果

• [雑誌論文] Endoscopic ultrasonography-guided pancreaticoduodenostomy with a lumen-apposing metal stent to treat main pancreatic duct dilatation (2021)
  • 著者名/発表者名: Kuwatani Masaki、Nagai Kosuke、Takishin Yunosuke、Furukawa Ryutaro、Hirata Hajime、Kawakubo Kazumichi、Sakamoto Naoya
  • 雑誌名: Endoscopy 巻: 54 ページ: E113～E114
  • DOI: 10.1055/a-1408-0148
  • 査読あり
• [雑誌論文] Placental growth factor promotes tumour desmoplasia and treatment resistance in intrahepatic cholangiocarcinoma (2021)
  • 著者名/発表者名: Aoki S,Inoue K,Klein S,Halvorsen S,Chen J,Matsui A,Nikmaneshi MR,Kitahara S,Hato T,Chen X,Kawakubo K,Nia HT,Chen I,Schanne DH,Mamessier E,Shigeta K,Kikuchi H,Ramjiawan RR,Schmidt TC,Iwasaki M,Yau T,Hong TS,Quaas A,Plum PS,Dima S,Popescu I,Bardeesy N,Munn LL,Borad MJ,Sassi S,Jain RK,Zhu AX,Duda DG.
  • 雑誌名: Gut 巻: 71 ページ: 185～193
  • DOI: 10.1136/gutjnl-2020-322493
  • 査読あり
• [雑誌論文] Possible reasons for the regrettable results of patency of an inside stent in endoscopic transpapillary biliary stenting (2021)
  • 著者名/発表者名: Kuwatani Masaki、Kawakubo Kazumichi、Sakamoto Naoya
  • 雑誌名: Digestive Endoscopy 巻: 34 ページ: 334～344
  • DOI: 10.1111/den.14006
  • 査読あり
• [雑誌論文] Immunoglobulin G4-related cholecystitis mimicking gallbladder cancer diagnosed by EUS-guided biopsy (2021)
  • 著者名/発表者名: Kuwatani Masaki、Nagai Kosuke、Takishin Yunosuke、Furukawa Ryutaro、Hirata Hajime、Kawakubo Kazumichi、Mitsuhashi Tomoko、Sakamoto Naoya
  • 雑誌名: Endoscopic Ultrasound 巻: - ページ: -
  • DOI: 10.4103/EUS-D-21-00028
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Trial protocol: a randomised controlled trial to verify the non-inferiority of a partially covered self-expandable metal stent to an uncovered self-expandable metal stent for biliary drainage during neoadjuvant therapy in patients with pancreatic cancer with obstructive jaundice (PUN-NAC trial) (2021)
  • 著者名/発表者名: Kuwatani Masaki、Kawakubo Kazumichi、Sugimori Kazuya、Inoue Hiroyuki、Kamada Hideki、Ishiwatari Hirotoshi、Kato Shin、Iwashita Takuji、Yoshida Makoto、Hashimoto Shinichi、Itonaga Masahiro、Mizukami Yusuke、Nomura Yusuke、Katanuma Akio、Sakamoto Naoya
  • 雑誌名: BMJ Open 巻: 11 ページ: e045698～e045698
  • DOI: 10.1136/bmjopen-2020-045698
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Efficacy of a novel ultra-sharp dilation device for dilating bare metal stent mesh in patients with hilar malignant biliary obstruction (2021)
  • 著者名/発表者名: Kato Shin、Kuwatani Masaki、Kawakubo Kazumichi、Furukawa Ryutaro、Hirata Koji、Takishin Yunosuke、Hirata Hajime、Sakamoto Naoya
  • 雑誌名: Scandinavian Journal of Gastroenterology 巻: 56 ページ: 374～377
  • DOI: 10.1080/00365521.2021.1879243
  • 査読あり