| 研究課題/領域番号 |
21K07944
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| 研究機関 | 長崎大学 |
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研究代表者 |
中尾 一彦 長崎大学, 医歯薬学総合研究科(医学系), 教授 (00264218)
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| 研究分担者 |
宮明 寿光 長崎大学, 医歯薬学総合研究科(医学系), 准教授 (20437891)
三馬 聡 長崎大学, 病院(医学系), 講師 (30437892)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| キーワード | 肝星細胞 / TGF-β / SOCS3 / STAT3 / DNA methyltransferase |
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| 研究実績の概要 |
ヒト肝星細胞株であるLX2細胞並びにHHSteCs細胞をTGF-β存在下で2継代以上培養することで両細胞に活性化（myofibroblast様形質転換）が誘導され、それが維持された。加えて、αSMAの発現、I型コラーゲン産生が確認された。JAK2-STAT3シグナルが肝星細胞の活性化に関与していることから、リガンドであるIL-6が肝星細胞の活性化にTGF-βと相加的に作用しうるか検討するため、TGF-βで活性化誘導した肝星細胞株にIL-6を添加したところ、IL-6濃度依存的にJAK2-STAT3シグナルの活性化が確認され、αSMA発現量、I型コラーゲン産生量も増加することが確認された。
一方、TGF-β によって活性化が維持された肝星細胞におけるSOCS3の発現量を活性化前と比較したところ、活性化肝星細胞においてSOCS3の発現低下が認められた。加えて、IL-6添加によるSOCS3の発現量変化も検討したところ、SOCS3の発現誘導は認めず、JAK2-STAT3シグナルに対するネガティブフィードバック経路が作動していないことが示唆された。そこで、SOCS3の発現低下ならびにフィードバック不応が、メチル化によるエピジェネティックな抑制であるかについて、以下の検討を行った。
メチル化によるエピジェネティックな抑制を明らかにするため、脱メチル化剤の5-aza処理を行うことでSOCS3の発現が回復するか否かを検討したところ、発現の回復とIL-6添加による発現誘導が認められた。同時にαSMA発現量、I型コラーゲン産生量の低下が認められた。次に、活性化前後のSOCS3遺伝子プロモーター領域のメチル化の解析により、メチル化部位の存在が示唆された。加えて、JAK2-STAT3シグナルの活性化により、DNA methyltransferaseの発現上昇を認めた。
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