高血圧診療の革新を目指す原発性アルドステロン症の自己抗体研究

2023 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 21K08099
• 研究機関: 金沢大学
• 研究代表者: 出村 昌史 金沢大学, 医学系, 准教授 (00507080)
• 研究期間 (年度): 2021-04-01 – 2025-03-31
• キーワード: 原発性アルドステロン症 / 自己抗体

研究実績の概要

両側性原発性アルドステロン症の患者血清の抗体価を測定したところ、特定の膜タンパク質（イオンチャンネルやポンプ）に対する抗体価が非常に高値を示す症例が存在し、また、高い抗体価を示す膜タンパク質が症例ごとに異なっており、症例ごとに異なる複数の自己抗原の存在が示唆された。そこで、バイオアッセイ系を確立し、各患者血清について刺激性抗体の証明を目指した。
細胞内カルシウムの増加により、アルドステロン合成酵素CYP11B2の転写刺激が生じることから、刺激性抗体活性を細胞内カルシウムの増加として測定することを試みた。イクオリンはカルシウムイオンと特異的に結合すると青色の瞬間発光を示すことから細胞内カルシウムのイメージングに利用することができる。チャイニーズハムスターの卵巣由来細胞（CHO細胞）に各膜タンパク質とカルシウムセンサーであるイオクリンを共発現させ、患者由来血清を添加した際の細胞内カルシウムの増加をとらえることで、刺激性活性とすることを目的とした。１８種類の膜タンパク質について発現ベクターを作成に取り組んでいる。また、作成できた発現ベクターを用いてCHO細胞への発現実験に取り組んでいる。
一方、副腎静脈サンプリングにて両側性、片側性の確定診断がなされた末梢血サンプル各７８例、および、正常血圧者３４例の血清について抗体価を測定した。
両側性原発性アルドステロン症の診断マーカーとして有用と考えられた抗原について、体外診断医薬品としての開発を目指してている。

現在までの達成度 (区分)

4: 遅れている

理由

人員確保が十分でなく、バイオアッセイ系実験などの推進に難渋したため。

今後の研究の推進方策

バイオアッセイ系の構築および、体外診断医薬品の開発を目指し共同研究を推進する。

次年度使用額が生じた理由

バイオアッセイ系実験などの推進に難渋したため、次年度使用額が生じた。人員を確保し、バイオアッセイ系実験、体外診断医薬品開発に向けて研究を進める。

研究成果

• [雑誌論文] Epigenetic alterations of 11beta-hydroxysteroid dehydrogenase 1 gene in the adipose tissue of patients with primary aldosteronism. (2024)
  • 著者名/発表者名: Takeda Y, Demura M, Kometani M, Karashima S, Aono D, Konishi S, Horike SI, Meguro-Horike M, Yoneda T, Takeda Y.
  • 雑誌名: Endocr J 巻: 71 ページ: 245-252
  • DOI: 10.1507/endocrj.EJ23-0103
• [雑誌論文] Impact of gut microbiome on the renin-aldosterone system: Shika-machi Super Preventive Health Examination results. (2023)
  • 著者名/発表者名: Mizoguchi R, Karashima S, Miyajima Y, Ogura K, Kometani M, Aono D, Konishi S, Demura M, Tsujiguchi H, Hara A, Nakamura H, Yoneda T, Okamoto S, Satou K.
  • 雑誌名: Hypertens Res 巻: 46 ページ: 2280-2292
  • DOI: 10.1038/s41440-023-01334-7
• [雑誌論文] Molecular and Epigenetic Control of Aldosterone Synthase, CYP11B2 and 11-Hydroxylase, CYP11B1. (2023)
  • 著者名/発表者名: Takeda Y, Demura M, Kometani M, Karashima S, Yoneda T, Takeda Y.
  • 雑誌名: Int J Mol Sci 巻: 24 ページ: 5782
  • DOI: 10.3390/ijms24065782