| 研究課題/領域番号 |
21K08227
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| 研究機関 | 名古屋大学 |
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研究代表者 |
秋山 真一 名古屋大学, 医学系研究科, 特任講師 (20500010)
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| 研究分担者 |
丸山 彰一 名古屋大学, 医学系研究科, 教授 (10362253)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| キーワード | 膜性腎症 / ネフローゼ症候群 / 責任抗原 / 自己抗体 |
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| 研究実績の概要 |
一次性膜性腎症の診療では責任抗原としてPhospholipase A2 receptor(PLA2R)やThrombospondin 7A(THSD7A)が発見されたことが契機となって自己抗体を指標にした鑑別や病勢評価など新しい診断法が普及し始めている。しかし、一次性膜性腎症の一部では未だ責任抗原が同定されておらず、とくに日本人の一次性膜性腎症患者で抗原不明なタイプが多い。本研究では、一次性膜性腎症の未知抗原を同定することで自己抗体を指標にした診断法の拡充に取り組んでいる。研究1年目は、日本人一次性膜性腎症患者の血液や腎組織を用いて未知責任抗原の探索と同定を進めた。本研究開始以前からいくつかの未知の責任抗原候補蛋白質を取得しており、本研究ではこれまでの技術的知見に基づいて更なる候補蛋白質の取得を目指した。単離糸球体、培養ポドサイト、腎組織に含まれる蛋白質に対して患者血清中に含まれるIgGが結合する蛋白質をスクリーニングした。併せて、ヒトポドサイトに発現する蛋白質からPLA2RやTHSD7Aに発現様式が似た蛋白質をin silico解析により抽出して抗原候補とした。得られた抗原候補蛋白質について組換え蛋白質の調製を順次開始した。すなわち、クローニングまたは合成によって取得したcDNAを用いてHEK293細胞を形質転換して組換え蛋白質を発現させる作業に着手した。組換え蛋白質と患者由来血清に含まれるIgGとの結合性評価試験は、これまでに得られた知見と候補抗原蛋白質の性質を考慮して非還元条件下Western blotに統一して実施することに決定した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
抗原候補蛋白質の探索が順調に進み、同定作業へ移行できている。
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| 今後の研究の推進方策 |
今後も当初の研究計画に沿って進める。具体的には、抗原候補蛋白質の探索と同定に係る分析と検討を進める。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
当初の計画よりも低コストな方法で研究を進めることができたことによって次年度使用が生じた。次年度使用は抗原候補蛋白質の同定に係る実験作業を拡充するために使用する予定。
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