ヒト急性GVHDにおける組織残存レシピエントT細胞の機能と臨床的意義の解明

2021 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 21K08387
• 研究機関: 名古屋大学
• 研究代表者: 村田 誠 名古屋大学, 医学系研究科, 准教授 (40378063)
• 研究期間 (年度): 2021-04-01 – 2024-03-31
• キーワード: 造血幹細胞移植 / 移植片対宿主病 / T細胞

研究実績の概要

本研究では、ヒト急性移植片対宿主病（GVHD）組織に浸潤するT細胞について、その細胞起源も含めて詳細に解析し、GVHD重症度や治療反応性などGVHD臨床経過との関連を明らかにすることを目指している。当該年度は、移植後に急性GVHDを発症しかつ一次治療に不応性となった3症例から、GVHD一次治療開始前と一次治療開始後（二次治療開始前）の2回、GVHD皮膚生検組織の提供を受けた。そして、それらの生検組織に浸潤するT細胞のTCR-Vβ CDR3塩基配列を、NGSを用いて網羅的に解析した。得られたTCR塩基配列から各TRBV familyの比率を一次治療の前後で比較したところ、いずれの症例においても構成する各TRBV familyの比率は、治療前後で大きく変化していた。また、GVHD皮膚組織浸潤T細胞のうち比較的高頻度（頻度1%以上）を示したTCRについて、その頻度の変化を一次治療の前後で比較したところ、いずれの症例においても一次治療開始前に高頻度だったT細胞クローンの多くは縮小し、代わって一次治療前には認めなかった新たな高頻度クローンが増幅していた。また、ある1症例の急性GVHD皮膚生検組織から5つのT細胞クローンの分離に成功し、STR法を用いてそれぞれの細胞起源を解析した。するとその内4つのT細胞クローンはドナー由来だったが、GVHD皮膚浸潤T細胞全体の23%を占めたある1つの高頻度T細胞クローンはレシピエント由来だった。現在さらに2症例から生検皮膚組織の提供を受け、解析を進めている。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

患者からのGVHD組織の検体収集は順調に進んでおり、またNGSを用いた網羅的TCR塩基配列の決定やT細胞クローンの分離、細胞起源の同定などの実験系もきちんと機能しており、これまでのところ本研究はおおむね順調に進展していると考えている。

今後の研究の推進方策

実験系は機能しており特に問題はない。今後は、移植患者に本研究の意義等について丁寧に説明し、さらに多くの検体の提供が得られるよう努力する。

次年度使用額が生じた理由

理由：購入予定だった試薬が当該年度内に納品できず、その支払いを翌年度に繰り越したため。
使用計画：上述の通り、試薬代（物品費）として使用する。

研究成果

• [雑誌論文] Total body irradiation-containing conditioning regimens without antithymocyte globulin in adults with aplastic anemia undergoing umbilical cord blood transplantation. (2022)
  • 著者名/発表者名: Hiramoto N, Yamazaki H, Nakamura Y, Uchida N, Murata M, Kondo T, Yoshioka S, Eto T, Nishikawa A, Kimura T, Ichinohe T, Atsuta Y, Onishi Y, Suzuki R, Mori T.
  • 雑誌名: Annals of Hematology 巻: 101 ページ: 165-175
  • DOI: 10.1007/s00277-021-04664-z.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cytomegalovirus gastroenteritis in patients with acute graft-versus-host disease. (2022)
  • 著者名/発表者名: Akahoshi Y, Kimura SI, Tada Y, Matsukawa T, Tamaki M, Doki N, Uchida N, Tanaka M, Nakamae H, Kuriyama T, Matsuoka KI, Ikeda T, Kimura T, Fukuda T, Kanda Y, Atsuta Y, Murata M, Terakura S, Nakasone H.
  • 雑誌名: Blood Advances 巻: 6 ページ: 574-584
  • DOI: 10.1182/bloodadvances.2021005885.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Antithymocyte Globulin Potentially Could Overcome an Adverse Effect of Acute Graft-versus-Host Disease in Matched-Related Peripheral Blood Stem Cell Transplantation. (2022)
  • 著者名/発表者名: Miyao K, Kuwatsuka Y, Murata M, Nagafuji K, Teshima T, Takeuchi Y, Shiratori S, Najima Y, Uchida N, Tanaka M, Sawa M, Ota S, Fukuda T, Ozawa Y, Kako S, Kawakita T, Ara T, Tanaka J, Kanda Y, Atsuta Y, Kanda J, Terakura S.
  • 雑誌名: Transplantation and Cellular Therapy 巻: 28 ページ: 153.e1-153.e11
  • DOI: 10.1016/j.jtct.2021.12.009.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Phase I clinical trial of intra-bone marrow cotransplantation of mesenchymal stem cells in cord blood transplantation. (2021)
  • 著者名/発表者名: Goto Tatsunori、Murata Makoto、Nishida Tetsuya、Terakura Seitaro、Kamoshita Sonoko、Ishikawa Yuichi、Ushijima Yoko、Adachi Yoshiya、Suzuki Satoshi、Kato Katsuyoshi、Hirakawa Akihiro、Nishiwaki Satoshi、Nishio Nobuhiro、Takahashi Yoshiyuki、Kodera Yoshihisa、Matsushita Tadashi、Kiyoi Hitoshi.
  • 雑誌名: Stem Cells Translational Medicine 巻: 10 ページ: 542-553
  • DOI: 10.1002/sctm.20-0381.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Comparison of Transplantation Outcomes after Foscarnet and Ganciclovir Administration as First-Line Anti-Cytomegalovirus Preemptive Therapy. (2021)
  • 著者名/発表者名: Miyao K, Terakura S, Ozawa Y, Sawa M, Kohno A, Kasahara S, Iida H, Ino K, Kusumoto S, Kasai M, Takami A, Kurahashi S, Kajiguchi T, Morishita T, Nishida T, Murata M.
  • 雑誌名: Transplantation and Cellular Therapy 巻: 27 ページ: 342.e1-342.e10
  • DOI: 10.1016/j.jtct.2020.12.012.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Effect of methotrexate dose in graft-versus-host disease prophylaxis after single-unit cord blood transplantation in adult acute myeloid leukemia. (2021)
  • 著者名/発表者名: Terakura S, Kuwatsuka Y, Sugita J, Takahashi S, Ozawa Y, Ozeki K, Yoshioka S, Nakamae H, Kawakita T, Sawa M, Morishige S, Najima Y, Katsuoka Y, Sakaida E, Kouzai Y, Kimura T, Ichinohe T, Fukuda T, Atsuta Y, Murata M, Teshima T.
  • 雑誌名: International Journal of Hematology 巻: 113 ページ: 840-850
  • DOI: 10.1007/s12185-021-03097-8.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Spacer Length Modification Facilitates Discrimination between Normal and Neoplastic Cells and Provides Clinically Relevant CD37 CAR T Cells. (2021)
  • 著者名/発表者名: Okuno S, Adachi Y, Terakura S, Julamanee J, Sakai T, Umemura K, Miyao K, Goto T, Murase A, Shimada K, Nishida T, Murata M, Kiyoi H.
  • 雑誌名: Journal of Immunology 巻: 206 ページ: 2862-2874
  • DOI: 10.4049/jimmunol.2000768.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Effect of Cytomegalovirus Reactivation With or Without Acute Graft-Versus-Host Disease on the Risk of Nonrelapse Mortality. (2021)
  • 著者名/発表者名: Akahoshi Y, Kimura SI, Inamoto Y, Seo S, Muranushi H, Shimizu H, Ozawa Y, Tanaka M, Uchida N, Kanda Y, Katayama Y, Shiratori S, Ota S, Matsuoka KI, Onizuka M, Fukuda T, Atsuta Y, Murata M, Terakura S, Nakasone H.
  • 雑誌名: Clinical Infectious Disseases 巻: 73 ページ: e620-e628
  • DOI: 10.1093/cid/ciaa1871.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Off-the-shelf bone marrow-derived mesenchymal stem cell treatment for acute graft-versus-host disease: real-world evidence. (2021)
  • 著者名/発表者名: Murata M (corresponding), Terakura S, Wake A, Miyao K, Ikegame K, Uchida N, Kataoka K, Miyamoto T, Onizuka M, Eto T, Doki N, Ota S, Sato M, Hashii Y, Ichinohe T, Fukuda T, Atsuta Y, Okamoto S, Teshima T.
  • 雑誌名: Bone Marrow Transplantation 巻: 56 ページ: 2355-2366
  • DOI: 10.1038/s41409-021-01304-y.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Combined impact of HLA-allele matching and the CD34-positive cell dose on optimal unit selection for single-unit cord blood transplantation in adults. (2021)
  • 著者名/発表者名: Yabe T, Satake M, Odajima T, Watanabe-Okochi N, Azuma F, Kashiwase K, Matsumoto K, Orihara T, Yabe H, Kato S, Kato K, Kai S, Mori T, Morishima S, Takanashi M, Nakajima K, Murata M, Morishima Y.
  • 雑誌名: Leukemia & Lymphoma 巻: 62 ページ: 2737-2746
  • DOI: 10.1080/10428194.2021.1929958.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Impact of HLA disparity on the risk of overall mortality in patients with grade II-IV acute GVHD on behalf of the HLA Working Group of Japan Society for Hematopoietic Cell Transplantation. (2021)
  • 著者名/発表者名: Fuji S, Hakoda A, Kanda J, Murata M, Terakura S, Inamoto Y, Uchida N, Toya T, Eto T, Nakamae H, Ikegame K, Tanaka M, Kawakita T, Kondo T, Miyamoto T, Fukuda T, Ichinohe T, Kimura T, Atsuta Y, Shintani A, Morishima S.
  • 雑誌名: Bone Marrow Transplantation 巻: 56 ページ: 2990-2996
  • DOI: 10.1038/s41409-021-01443-2.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Treatment of Steroid-Refractory Acute Graft-Versus-Host Disease Using Commercial Mesenchymal Stem Cell Products. (2021)
  • 著者名/発表者名: Murata M, Teshima T.
  • 雑誌名: Frontiers in Immunology 巻: 12 ページ: 724380
  • DOI: 10.3389/fimmu.2021.724380.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] CD37CAR-T細胞のスペーサーの長さを微調整することで最適なシグナルを得ることができる. (2021)
  • 著者名/発表者名: 安達 慶高, 奥野真吾, 寺倉精太郎, Jakrawadee Julamanee, 堺 寿保, 宮尾康太郎, 村瀬 篤史, 尾﨑 正英, 今井 奏衣, 梅村 晃史, 葉名尻 良, 島田 和之, 西田徹也, 村田 誠, 清井 仁.
  • 学会等名: 第13回日本血液疾患免疫療法学会学術集会
• [学会発表] ヒト急性GVHD組織におけるT細胞応答. (2021)
  • 著者名/発表者名: 村田 誠.
  • 学会等名: 第29回日本組織適合性学会大会
• [学会発表] Phase I study of piggyBac transposon mediated CD19: CAR-T therapy for acute lymphoblastic leukemia. (2021)
  • 著者名/発表者名: Nishio N, Hanajiri R, Ishikawa Y, Terakura S, Nishida T, Murata M, Hamada M, Nishikawa E, Kawashima N, Okuno Y, Narita A, Muramatsu H, Takahashi Y.
  • 学会等名: 第83回日本血液学会学術集会
• [学会発表] The optimal signal can be obtained by fine-tuning the spacer length of CD37CAR-T cells. (2021)
  • 著者名/発表者名: 安達 慶高, 寺倉 精太郎, 奥野 友介, 佐藤 好隆, 尾崎 正英, 今井 奏衣, 梅村 晃史, 堺 寿保, 葉名尻 良, 西田 徹也, 村田 誠, 清井 仁.
  • 学会等名: 第83回日本血液学会学術集会
• [学会発表] Genome-wide CRISPR-Cas9 screening to identify the genes regulating human CAR-T cells proliferation. (2021)
  • 著者名/発表者名: 安達 慶高, 寺倉 精太郎, 奥野 友介, 佐藤 好隆, 尾崎 正英, 今井 奏衣, 梅村 晃史, 堺 寿保, 葉名尻 良, 西田 徹也, 村田 誠, 清井 仁.
  • 学会等名: 第83回日本血液学会学術集会
• [学会発表] Cytomegalovirus Gastroenteritis in Patients with Acute Graft-Versus-Host Disease. (2021)
  • 著者名/発表者名: Akahoshi Y, Kimura S-I, Tada Y, Matsukawa T, Tamaki M, Doki N, Uchida N, Tanaka M, Nakamae H, Kuriyama T, Matsuoka K-I, Ikeda T, Kimura T, Fukuda T, Kanda Y, Atsuta Y, Murata M, Terakura S, Nakasone H.
  • 学会等名: The 63rd annual meeting of the American Society of Hematology
  • 国際学会
• [学会発表] A Phase I Study of CD19 Chimeric Antigen Receptor-T Cells Generated By the PiggyBac Transposon Vector for Acute Lymphoblastic Leukemia. (2021)
  • 著者名/発表者名: Nishio N, Hanajiri R, Ishikawa Y, Murata M, Taniguchi R, Hamada M, Nishikawa E, Kawashima N, Narita A, Muramatsu H, Takahashi Y.
  • 学会等名: The 63rd annual meeting of the American Society of Hematology
  • 国際学会