| 研究課題/領域番号 |
21K08620
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| 研究機関 | 徳島大学 |
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研究代表者 |
居村 暁 徳島大学, 大学院医歯薬学研究部(医学域), 徳島大学専門研究員 (90380021)
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| 研究分担者 |
常山 幸一 徳島大学, 大学院医歯薬学研究部(医学域), 教授 (10293341)
池本 哲也 徳島大学, 病院, 特任教授 (20398019)
山田 眞一郎 徳島大学, 病院, 特任助教 (30579884)
齋藤 裕 徳島大学, 病院, 講師 (50548675)
森根 裕二 徳島大学, 大学院医歯薬学研究部(医学域), 准教授 (60398021)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| キーワード | 肝星細胞 / 薬剤耐性肝癌 / 癌関連線維芽細胞 |
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| 研究実績の概要 |
研究目的；Lenvatinibは血管内皮増殖因子受容体(VEGFR)1~3、線維芽細胞増殖因子受容体(FGFR)1~4、血小板由来増殖因子受容体α(PDGFRα)、rearranged drug transfection(RET)、幹細胞因子受容体(KIT)等の受容体型チロシンキナーゼを選択的に阻害するマルチキナーゼである。我々はすでにSorafenib resistant HCCとCAFの相互作用においてBAFF/NFKB axisが活性されていることが報告しており(Gao L, et al. Cancer Science. 2021)、今回はLenvatinib resistant HCCとCAFの相互作用における分子メカニズムを検討することが目的である。
実験計画；Lenvatinib 耐性肝細胞癌株がparental cellと比較し3～4倍耐性になるように調整（Lenvatinib 25μM）。肝細胞癌株はHuH7なびにPLCを使用。Lenvatinib Huh7/PLC 培養液を用いて肝星細胞株 LX2を刺激し、CAF作成し、CAF marker (αSMA、FAP)のmRNA測定。Lenvatinib resistant Huh7/PLC 培養液を用いたparental Huh7/PLCのproliferation assay。
実験進捗；Lenvatinib resistant Huh7/PLCはいずれもparentalと比較し3.5～4.0倍程度Lenvatinib耐性であることをIC50で確認した。Huh7/PLC CAF、Lenvatinib resistant Huh7/PLCいずれもCAF markerのαSMA、FAPが有意に上昇していたが、耐性の有無で比較しても有意差はなかった。Lenvatinib resistant 培養液でのHuh7/PLCのproliferation rateはparental培養液と比較して有意に上昇していた。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
Sorafenib耐性肝細胞癌株の作成のプロトコールでLenvatiniv耐性肝細胞癌株の作成に成功しており、順次予定した実験をすすめられている。今後もこの耐性肝細胞癌株は使用継続の予定であり、作成には長期を要するため、順次培養凍結を繰り替えす必要がある。
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| 今後の研究の推進方策 |
Lenvatinib resistant Huh7/PLC培養液のサイトカインアッセイ、Exosome抽出、薬剤耐性に関してのNrf2の関与の検討など、in vitroでの検討を予定する。最終的にはLenvatinib耐性肝細胞癌株をin vivoで移植し、CAFの制御による肝内転移抑制機構について証明する。
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