| 研究課題/領域番号 |
21K08666
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| 研究機関 | 長崎大学 |
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研究代表者 |
今村 亮一 長崎大学, 医歯薬学総合研究科(医学系), 教授 (40456976)
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| 研究分担者 |
谷口 歩 大阪大学, 医学部附属病院, 医員 (10845225)
野々村 祝夫 大阪大学, 大学院医学系研究科, 教授 (30263263)
難波 倫子 大阪大学, 大学院医学系研究科, 助教 (30734420)
阿部 豊文 大阪大学, 大学院医学系研究科, 招へい教員 (90750894)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| キーワード | 抗体関連型拒絶反応 / 腎移植後 / ペプチド / バイオマーカー / 質量分析 / BLOTCHIP-MS |
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| 研究実績の概要 |
腎移植後抗体関連型拒絶反応(antibody-mediated rejection, 以下AMR)は抗ドナー抗体(Donor-specific antibody, 以下DSA)の産生により惹起されることが知られている、AMRは発症してしまえば十分な治療法がなく、AMR発症直前または直後の段階で血中のDSA産生を確認し、治療介入することが重要である。一方、早期では産生されたDSAは移植腎に吸着し血中を循環しないため、その有無を同定することが極めて困難である。従って血中DSA産生を早期に確認しうる新たなバイオマーカーの確立が求められている。
我々はBLOTCHIP-MS法を用いて、疾患が発症したことにより血中に放出されるペプチドを同定することにより、DSA産生やAMRの診断にも応用が可能か検討した。なお、本手法はすでに妊娠高血圧および大腸癌のモニタリング方法として報告されている。
我々は腎移植患者の血清のうち、①DSA(+)AMR(+)例、①DSA(+)AMR(-)例、①DSA(-)AMR(-)例をランダムに抽出し、特異的ペプチド発現の有無を測定した。その結果、DSA産生時はFibrinogen alpha chainが減少し、Kininogen1が増加することが確認できた。また後者に関してはAMRが発症していないときは増加するが、発症した時点で減少に転ずることが確認できた。（前者はAMR発症にかかわらず、DSA産生にて減少が持続した。）つまりこの２つのペプチドを測定することにより、AMR発症直前のearly phaseまたはAMR発症後のactivation phaseの確認もできることが証明され、AMR発症早期診断のバイオマーカーとなりうることを見出した。
我々はこの結果を検証するため、現在validation study群においてさらに症例数を追加し、解析を行っている。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
COVID-19感染拡大により、全国的に腎移植症例が大幅に減少した。AMRは腎移植後比較的早期に発症する可能性が高いため、症例数の低下がAMR発症例の低下につながっている。そのため解析可能症例数が減少し、研究はやや遅延状態にある。COVID-19感染症の社会状況の変化、第5類への移行とともに、現在移植症例数は回復傾向にあり、AMR発症症例数も増加、研究の進捗状況も回復してくると思われる。
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| 今後の研究の推進方策 |
これまで世界中がAMRに対して腎生検による診断や産生された抗体測定に固執してきたが、本研究により付随産生物質と想定されるペプチドをモニタリングすることで診断するという全く新しい概念を確立できつつあると考えている。我々はこれまで施行してきた後方視的解析だけではなく、最終的にはprospective studyによる解析が必要であると考えている。ただし難治性拒絶反応であるものの、単施設では症例数が限定的であるため多施設共同研究を行う必要がある。後方視的研究の論文をもとに多施設共同研究を提案し、本ペプチドの発現と同時に腎生検を行い、腎生検でAMRが認められなかった症例に関してはその時点で治療介入する群としない群の2群に分類し、その有効性を検証していく予定である。
また本検査法に関しては、将来キット化をも検討しうると考えている。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
COVID-19感染拡大により腎移植症例数が減少し、並行して抗体関連型拒絶反応（AMR）発症症例も減少した。また確定診断として行ってきた経皮的移植腎生検術も、AMRを疑った症例であっても前記感染症により入院困難となり、当該年度予定の研究を十分遂行できず、次年度使用額が生じた。つまり解析対象となる症例数が低下したことが影響している。
幸いCOVID-19感染症の社会状況により症例数が回復傾向にあり、それに伴いAMR発症症例、腎生検施行可能症例も増加すると思われ、研究は遂行しうると判断している。
繰り越した経費に関しては、DSA産生の確認のための試薬代、腎生検によりAMR発症の有無を確認するための病理組織サンプル作成費用およびC4d抗体等の試薬購入代、BLOTCHIP-MS法施行のための検査費用に充当する予定である。
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