バイオマーカーに基づくMAGE-A4／CAR-T細胞作製による食道癌の免疫療法

2022 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 21K08682
• 研究機関: 三重大学
• 研究代表者: 影山 愼一 三重大学, 医学系研究科, リサーチアソシエイト (80194695)
• 研究分担者: 宮原 慶裕 三重大学, 医学系研究科, 産学官連携講座教授 (10582083)
• 研究期間 (年度): 2021-04-01 – 2024-03-31
• キーワード: 食道癌 / CAR-T療法

研究実績の概要

本研究は、食道癌の約50%に発現するMAGE-A4抗原を標的とするCAR-T療法の開発のために、既に臨床試験で細胞輸注されたTCR遺伝子導入T細胞の形質解析、遺伝子発現、代謝物質の網羅的解析を行い、臨床試験の情報（有害事象、臨床効果、等）に関連するバイオマーカーの抽出を行うものである。
NY-ESO-1/TCR-T細胞輸注を実施し同意のもとで保管されている臨床検体を使用し、サイトカイン放出症候群（CRS）、臨床反応と製造TCR-T細胞、輸注後の末梢血TCR-T細胞の免疫細胞学的解析を行った。
Mass cytometryと36種のメタルタグ抗体のパネルを用い、輸注後の患者検体におけるTCR-T製品とその末梢血検体の解析の結果、すべての製造TCR-T細胞の不均一なT細胞マーカー発現が観察された。CRS発症検体のT細胞ではCD244とCD39の顕著な発現があり、一方、CRS発症のない症例のT細胞では、両マーカーの発現が低発現であった。高次元データを可視化するためUMAP（Uniform Manifold Approximation and Projection）を用いると、CRSの製造TCR-T細胞中のNY-ESO-1特異的T細胞の表現型は、2つの細胞クラスターにおいて主にCD244、CD39、CD45RAの発現上昇とCCR7の欠如によりの特徴づけされていた。
MAGE-A4/CAR-T細胞細胞の作製については、遺伝子導入に用いる新規ベクターを選定した。これはGITR細胞内ドメイン遺伝子を活性化シグナルとするCAR遺伝子導入用レトロウイルスである。ヒトT細胞に遺伝子導入し、免疫不全NOGマウスでのin vivo担癌モデルにおいて腫瘍増殖抑制を示していた。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

臨床試験で細胞輸注されたTCR遺伝子導入T細胞（NY-ESO-1）のフェノタイプ解析、免疫機能解析を実施し、臨床効果に関連する因子について推察できた。
研究成果の一部を論文発表した。

今後の研究の推進方策

2023年度は臨床試験で細胞輸注されたTCR遺伝子導入T細胞の解析によって得られた知見に基づき、CAR-T細胞を作製し、その抗腫瘍効果を検証する。

次年度使用額が生じた理由

本年度はフェノタイプ解析・免疫機能解析の一部が実施しなかったため使用額が当初より減じた。この解析は次年度での実施となり、2023年度の解析計画は動物モデルとなり、それに見合う使用計画とする。

研究成果

• [雑誌論文] Chimeric antigen receptor T-cell therapy targeting a MAGE A4 peptide and HLA-A*02:01 complex for unresectable advanced or recurrent solid cancer: protocol for a multi-institutional phase 1 clinical trial (2022)
  • 著者名/発表者名: Okumura S, Ishihara M, Kiyota N, Yakushijin K, Takada K, Kobayashi S, Ikeda H, Endo M, Kato K, Kitano S, Matsumine A, Nagata Y, Kageyama S, Shiraishi T, Yamada T, Horibe K, Takesako K, Miwa H, Watanabe T, Miyahara Y, Shiku H.
  • 雑誌名: BMJ Open 巻: 12 ページ: e065109
  • DOI: 10.1136/bmjopen-2022-065109.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] NY-ESO-1-specific redirected T cells with endogenous TCR knockdown mediate tumor response and cytokine release syndrome (2022)
  • 著者名/発表者名: Ishihara M, Kitano S, Kageyama S, Miyahara Y, Yamamoto N, Kato H, Mishima H, Hattori H, Funakoshi T, Kojima T, Sasada T, Sato E, Okamoto S, Tomura D, Nukaya I, Chono H, Mineno J, Kairi MF, Diem Hoang Nguyen P, Simoni Y, Nardin A, Newell E, Fehlings M, Ikeda H, Watanabe T, Shiku H.
  • 雑誌名: J Immunother Cancer 巻: 10 ページ: e003811.
  • DOI: 10.1136/jitc-2021-003811.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Prognostic significance of NY-ESO-1 antigen and PIGR expression in esophageal tumors of CHP-NY-ESO-1-vaccinated patients as adjuvant therapy (2022)
  • 著者名/発表者名: Nagata Y, Kageyama S, Ishikawa T, Kokura S, Okayama T, Abe T, Murakami M, Otsuka K, Ariyoshi T, Kojima T, Taniguchi K, Kobayashi S, Shimada H, Yajima S, Suzuki T, Hirano S, Tsuchikawa T, Shichinohe T, Ueda S, Kanetaka K, Yoneda A, Wada H, Doki Y, Yamaue H, Katsuda M, Ohi M, Yasuda H, Kondo K, Kataoka M, et al.
  • 雑誌名: Cancer Immunol Immunother 巻: 71 ページ: 2743-2755
  • DOI: 10.1007/s00262-022-03194-5.
  • 査読あり / オープンアクセス