新規ゲノム機能解析法による微小膵癌検出法の開発

2023 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 21K08746
• 研究機関: 弘前大学
• 研究代表者: 袴田 健一 弘前大学, 医学研究科, 教授 (30271802)
• 研究分担者: 石戸 圭之輔 弘前大学, 医学研究科, 准教授 (00436023) ; 三浦 卓也 弘前大学, 医学部附属病院, 講師 (30722136) ; 脇屋 太一 弘前大学, 医学研究科, 客員研究員 (50571246) ; 木村 憲央 弘前大学, 医学研究科, 講師 (60436029)
• 研究期間 (年度): 2021-04-01 – 2024-03-31
• キーワード: 膵癌 / Kras変異 / Liquid biopsy

研究実績の概要

難治がんの代表格である膵癌の予後改善には、１）新規抗癌薬の開発、２）局所病変の確認と適切な局所治療（手術、放射線治療）の選択、３）潜在的全身病変の病勢確認法の開発、が必須である。本研究課題では現在困難である２）３）の診断の信頼性を向上させ、適時に抗がん剤による全身治療を介入することを目的に、Liquid biopsyの開発に挑んだ。内容は、新規ゲノム開発法を駆使した「微小転移検出開発」であり、当初はKras遺伝子変異の新規検出法の開発と、遊離膵癌細胞の検出によるKras変異診断の２つのテーマを掲げたが、研究の進捗の中で、前者の有用性が明らかになり、かつ臨床試験への発展が可能であったためKras遺伝子変異の新規検出法の開発と、新規に開発した検出法を用いて切除可能膵癌の切除標本のKras遺伝子変異と術前後で血清Kras遺伝子変異検出を経時的評価を行い、Liquid biopsyとしての有用性を評価することとした。併せて、予後不良例のプロテオミクス解析も行い、Liquid biopsy対象症例の絞り込みについても検討した。その中で、Kras mutation変異以外に併存する糖尿病関連のepigenetic changesが微小転移検出の新たな候補として浮上したため、各種変化と予後との関係ならびに新規検出法の開発を併せて行った。
結果、Kras遺伝子変異の検出については、KRAS G12Dに加えKRAS G12C、KRAS G12VについてcfDNA濃度を調整してサンプル検体を作成し、複数の増幅検査法で検出感度の検証を実施したのち、血漿中cfDNA濃度を調整してPCR測定の指摘条件を検証した。現在は、膵癌患者の化学療法前後の血漿を用いてKras遺伝子変異の測定、さらに切除標本でKRAS変異を確認し、KRAS変異検出によるLiquid biopsyの腫瘍動態解析の意義を継続検討している。

研究成果

• [雑誌論文] Noninvasive Computed Tomography-Based Deep Learning Model Predicts In Vitro Chemosensitivity Assay Results in Pancreatic Cancer. (2024)
  • 著者名/発表者名: Kanda T, Wakiya T, Ishido K, Kimura N, Nagase H, Yoshida E, Nakagawa J, Matsuzaka M, Niioka T, Sasaki Y, Hakamada K.
  • 雑誌名: Pancreas 巻: 53 ページ: e55-561
  • DOI: 10.1097/MPA.0000000000002270
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Postoperative long-term outcomes of acute normovolemic hemodilution in pancreatic cancer: A propensity score matching analysis. (2024)
  • 著者名/発表者名: Wakiya T, Ishido K, Kimura N, Nagase H, Kanda T, Kubota S, Fujita H, Takahashi Y, Yamamoto T, Chida K, Saito J, Hirota K, Hakamada K.
  • 雑誌名: Oncol Lett 巻: 27 ページ: 236
  • DOI: 10.3892/ol.2024.14369
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Dual epigenetic changes in diabetes mellitus-associated pancreatic ductal adenocarcinoma correlate with downregulation of E-cadherin and worsened prognosis. (2023)
  • 著者名/発表者名: Hara Y, Mizukami H, Yamazaki K, Yamada T, Igawa A, Takeuchi Y, Sasaki T, Kushibiki H, Murakami K, Kudoh K, Ishido K, Hakamada K.
  • 雑誌名: J Pathol Clin Res 巻: 9 ページ: 354-366
  • DOI: 10.1002/cjp2.326.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] Novel surgical challenges for unresectable pancreatic cancer (2023)
  • 著者名/発表者名: Ishido K, Kimura N, Nagase H, Wakasa Y, Hakamada K
  • 学会等名: 第35回日本肝胆膵外科学会学術集会
• [学会発表] The clinicopathological features of the Stage I pancreatic ductal adenocarcinoma (2023)
  • 著者名/発表者名: Nagase H, Ishido K, Kimura N, Wakasa Y, Yamamoto T, Matsumoto S, Hakamada K
  • 学会等名: 第35回日本肝胆膵外科学会学術集会
• [学会発表] ORNi-PCR法を応用した膵癌患者血漿中KRAS遺伝子変異高感度検出法の確立 (2023)
  • 著者名/発表者名: 藤田 博陽、藤田 敏次、石戸圭之輔、木村 憲央、長瀬 勇人、袴田 健一、藤井 穂高
  • 学会等名: 第78回日本消化器外科学会総会
• [学会発表] 浸潤性膵管癌における2型糖尿病長期罹患とDNMT1発現との関連 (2023)
  • 著者名/発表者名: 山﨑 慶介、水上 浩哉、竹内 祐貴、山田 貴大、工藤 和洋、袴田 健一
  • 学会等名: 第78回日本消化器外科学会総会
• [学会発表] 局所進行切除不能膵癌における有効なconversion surgeryの条件検討 (2023)
  • 著者名/発表者名: 石戸圭之輔、木村 憲央、長瀬 勇人、若狭 悠介、袴田 健一
  • 学会等名: 第78回日本消化器外科学会総会
• [学会発表] Harmony across boundaries. Challenges beyond borders. (2023)
  • 著者名/発表者名: Hakamada K
  • 学会等名: 第78回日本消化器外科学会総会
  • 招待講演
• [学会発表] A study of risk factors related to new diabetes mellitus after pancreatectomy (2023)
  • 著者名/発表者名: Ishido K, Fujita H, Kimura N, Nagase H, Wakasa Y, Hakamada K
  • 学会等名: The 34th IASGO World Congress
  • 国際学会
• [学会発表] Association of long-term type 2 diabetes mellitus with DNMT1 in pancreatic ductal carcinoma. (2023)
  • 著者名/発表者名: Yamazaki K, Kimura N, Ishido K, Nagase H, Wakasa Y, Yamada T, Ogasawara K, Takeuchi Y, Mizukami H, Hakamada K
  • 学会等名: 9TH Biennial Congress of the Asian-Pacific Hepato-pancreato-Biliary Association
  • 国際学会
• [学会発表] 膵癌オリゴメタスターシス治療における現状と展望 (2023)
  • 著者名/発表者名: 袴田健一
  • 学会等名: 第31回日本消化器関連学会週間（JDDW2023）
  • 招待講演