| 研究課題/領域番号 |
21K08761
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| 研究機関 | 大阪医科薬科大学 |
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研究代表者 |
内山 和久 大阪医科薬科大学, 医学部, 教授 (80232867)
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| 研究分担者 |
小村 和正 大阪医科薬科大学, 医学部, 講師 (10789853)
谷口 高平 大阪医科薬科大学, 医学部, 講師 (70779686)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| キーワード | PTBP1 / ワールブルグ効果 / microRNA / 膵癌 / 精巣腫瘍 |
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| 研究実績の概要 |
先ずは、各臓器のヒト正常20臓器のRNAに対して対象とするmicroRNA(miRNA)の発現をRT-PCRで解析した。miRNA-Xは膵臓特異的、miRNA-Yは精巣特異的に発現が極端に集中しており、これまでPTBP1を標的にするmiRNAsが脳、骨格筋に特異的に発現していたことと、同様のシステムが内在することが示唆された。そこで、miRNA-Xの膵臓がんにおける機能解析から実験を開始した。これまでに収集が進んでいた膵癌患者の癌部、非癌部に対して、miRNA-Xの発現を解析すると共に、同患者組織検体からタンパクを抽出し、PTBP1および、PKM2の発現を解析した。PTBP1およびPKM2のタンパク発現は亢進しており、膵癌の発癌過程でもエネルギー代謝のリプログラミング（解糖系経路の活性化）が生じている可能性が示唆された。しかし、同一症例の検体を用いて実施したmiRNA-Xの発現解析では、miRNA-Xの発現低下を示すことができなかった。一方で共同研究者、徳丸剛久のサポートによりThe Cancer Genome Atlasのデータセットを用いて膵臓がんにおける正常・腫瘍組織中のmiRNA-Xの発現を比較したところ正常組織に比べ、腫瘍組織でmiRNA-Xの発現低下を認めた。膵癌細胞株のmiRNA-Xの発現解析では、膵癌細胞株6種を用いて検討し、今後細胞実験を行う際に使用する細胞株の選定を行うことが出来た。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
今回の検討では、非癌部に比べ癌部でmiRNA-Xの発現低下を示すことができなかった。この結果に関しては、収集後の時間経過によりmiRNAの分解が進んでしまっていた可能性や、採取部位が不適切な可能性があるため、確実な検体収集を前向きに実施し再検討する必要がある。また、精巣腫瘍に関しては想定していたより検体数がなく十分に実験を実施できなかった。コロナ対応に追われたことも当初の計画通りに研究を進めることが出来なかった要因である。
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| 今後の研究の推進方策 |
膵癌に関しては、以下の３点で実験を前向きに進める計画である。1:前向きに検体を収集し直し比較的新鮮な検体で実験を実施する。2:ホルマリン切片からマイクロダイセクションなどを用いてmiRNAを抽出し確実に癌部、非癌部の検体を用いる。3:新たな取り組みとしてmiRNAの免疫組織化学染色の実験系を構築し、癌、非癌部の境界領域で発現強度を比較検討する。細胞実験に関してはこれまでの計画に沿って引き続き進める。
精巣腫瘍に関しては、引き続き検体の取集を進める。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
コロナ対応に追われ、研究を当初の計画通りに進める事が出来なかったため、次年度使用額が生じた。次年度は、PTBP1を標的とするmiRNAの内、膵臓癌で脱制御が生じているmiRNAから、臨床検体を用いた発現解析および膵臓癌細胞株を使用したmiRNAの機能解析を計画しており、これらの実験に使用する予定である。
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| 備考 |
適宜、更新予定である。
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