研究課題/領域番号 |
21K09273
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研究機関 | 岐阜大学 |
研究代表者 |
平川 明弘 岐阜大学, 大学院医学系研究科, 特任准教授 (50422720)
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研究分担者 |
河村 真吾 岐阜大学, 医学部附属病院, 助教 (30456511)
秋山 治彦 岐阜大学, 大学院医学系研究科, 教授 (60402830)
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研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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キーワード | 未分化Schwann細胞 / 末梢神経再生 / PI3K/Aktシグナル / Wnt /β-catenin シグナル |
研究実績の概要 |
PI3K/Aktシグナルの関与を解析するため、Schwann 細胞特異的遺伝子改変マウス:Sox10-CreERT2マウスとPten flox(gain of function)マウス、Rosa26-stop-Pten(loss of function)マウス(2019年度先端モデル動物支援プラットフォーム採択に作製)を交配し、Sox10-CreERT2/Pten flox/floxおよび、Sox10-CreERT2/Rosa26-stop-Ptenを作製した。 同様にWnt/β-cateninシグナルの関与を解析するため、Sox10-CreERT2マウスとβ-catenin ex3 flox(gain of function)、 β-catenin ex2-6 floxマウス(loss of function)を交配し、Sox10-CreERT2/β-catenin ex3 flox 、Sox10-CreERT2/β-catenin ex2-6 flox/floxを作製した。 Sox10-CreERT2/Pten flox/floxマウスにタモキシフェンおよびcorn oil(コントロール)を投与後、坐骨神経損傷モデルを作製した。受傷後5日目で組織標本を作製し、分化シュワン細胞マーカー(Mbp)、未分化シュワン細胞マーカー(Ngfr)、軸索マーカー(TujI)による免疫染色を行った。その結果、シュワン細胞におけるPI3K/Aktシグナル亢進によって、シュワン細胞の脱分化が遅延することが示唆された。 現在、Sox10-CreERT2/Rosa26-stop-Pten、Sox10-CreERT2/β-catenin ex3 flox 、Sox10-CreERT2/β-catenin ex2-6 flox/floxマウスにおいても同様の実験を行っている。
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現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
上記マウス作製のために、時間を要したため。
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今後の研究の推進方策 |
PI3K/AktシグナルについてはSox10-CreERT2/Pten flox/floxマウス、Sox10-CreERT2/Rosa26-stop-Ptenマウスを用いて坐骨神経損傷モデルを作製し、損傷後3日、5日、7日、14日、28日で坐骨神経損傷部のRNA、タンパク、組織標本を回収し、シュワン細胞の分化状態の変化、軸索伸長能を評価するとともに、下肢筋の神経再支配の程度をトレッドミル走行試験、下腿筋体積測定により評価する。 また、Wnt/β-cateninシグナルの関与を解析についても Sox10-CreERT2/β-catenin ex3 flox、Sox10-CreERT2/β-catenin ex2-6 flox/floxマウスを用いて上記と同様の評価を行う。
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