| 研究課題/領域番号 |
21K09521
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| 研究機関 | 長崎大学 |
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研究代表者 |
北島 道夫 長崎大学, 医歯薬学総合研究科(医学系), 准教授 (50380845)
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| 研究分担者 |
北島 百合子 長崎大学, 病院(医学系), 助教 (40380901)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| キーワード | 卵巣予備能 / 卵巣間質組織 / 初期卵胞発育 / 炎症 / 線維化 |
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| 研究実績の概要 |
前年度に行ったヒト凍結融解卵巣組織のヌードマウスへの移植実験を継続して行った．本年度はヒト卵巣組織移植による線維化や原始卵胞の消失等の卵巣組織における変化が移植する組織片の性状により変化するかに着目した．卵巣組織への切開処理が原始卵胞の活性化を惹起する既報での知見を応用した．移植するヒト卵巣組織片に非血管損傷性の微小切開を加えて組織中の原始卵胞を活性化させたうえで移植するものとそのまま移植するものに分けて検討することとした．予備実験として，ヒト卵巣組織表層に径0.5mmの生検用トレパンで浅い切開を全面に加えて，組織構築の変化を確認した．生検用トレパンによる表層処置は，卵巣の皮質に限局した組織切創として確認でき，髄質の血管の損傷は認められなかった．これらをヌードマウスに移植して3ヶ月後に摘出し組織構築の変化を解析した．移植片は表層処理の有無にかかわらず高度の線維化を示していた．原始卵胞の遺残あるいは減少の程度については測定できなかった．使用した卵巣組織の由来が限定的な凍結融解組織であるため追加して検討中である．若年の婦人科癌患者の手術が少なく同意を取れる例がなく，本年度は追加して卵巣組織を取得して凍結保存することはできなかった．
ヌードマウスでの移植実験での知見を学会で発表し論文にまとめた．
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
4: 遅れている
理由
ヌードマウスモデルでは移植片が小さいことと移植組織の変化が著しく，線維化の過程を捉えることが難しいと判断したため，短期的な組織培養による系で初期の線維化と原始卵胞の活性の変化を検討することとした．小さなヒト卵巣組織片における原始卵胞の同定には由来となる症例の年齢や組織片毎の個体差が強く，卵胞とその周囲の間質細胞の変化を評価できる検体が得られず十分な評価ができていない．
手術症例における社会的背景から，若年女性の卵巣組織検体の追加保存が得られず卵巣予備能が十分に保たれた検体を実験に供することができていない．
移植組織片は組織量が少ないうえ変性が強く固定条件の設定が難しいためかLCMでintactなRNAを抽出できていないため実験が予定通りに行えていない．
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| 今後の研究の推進方策 |
卵巣組織の非血管損傷性の表層皮質処理の方法を確立したので，それらの卵巣皮質の組織構築と恒常性に与える影響を卵巣組織培養と組み合わせて評価を追加していきたい．
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| 次年度使用額が生じた理由 |
本年度は新たに得られた組織検体が少なく主に保存していた検体を用いて前年度までとは異なる系での実験を行ったため使用した動物数が少なく経費が少なくなった．また，組織培養が予備実験に留まったため，組織学的検討に使用する資材が少なかった．次年度は短期培養系による組織構築の変化の検討を充実させていく予定である．社会的状況の変化から発表や意見交換のための学会出席が可能になってきているため旅費に充てる予定である．また，結果発表のための投稿費に使用したいと考えている．
よって，繰越額は実験に用いる消耗品，研究補助者の人件費，学会等の旅費や学会誌への投稿費に充てる予定である．
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