| 研究課題/領域番号 |
21K09788
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| 研究機関 | 東京医科歯科大学 |
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研究代表者 |
森 弘樹 東京医科歯科大学, 大学院医歯学総合研究科, 教授 (80345305)
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| 研究分担者 |
植村 法子 東京医科歯科大学, 医学部附属病院, 助教 (10568017)
田中 顕太郎 東京医科歯科大学, 大学院医歯学総合研究科, 教授 (20569503)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| キーワード | スカフォールド / 脂肪再生 |
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| 研究実績の概要 |
近年、乳房再建において、スキャフォールドを移植する考えが提唱され、脂肪を注入するためのスペースを確保する観点から体外式組織拡張器が注目されている。そして、リンパ浮腫で脂肪増生が起こることはよく知られている これらの背景のもと、「スキャフォールドの移植とそれを維持する外陰圧装置とリンパ液の漏出によりリンパ浮腫の病態を作成すれば脂肪増生を促せる」と仮説をたてた。本研究は培養実験により各種スキャフォールドと脂肪細胞の３次元培養における脂肪細胞の接着・増生の比較を行う。また動物実験によってスキャフォールドと外陰圧装置による耐圧空間の作成とリンパ漏出モデルを作成し、このモデルを用いて脂肪増生の比較を行う。これらによって乳房再建の新たな治療法の開発を試みる。
【研究1：各種スキャフォールドでの脂肪前駆細胞培養】生物学的スキャフォールドとして、コラーゲン (コラーゲンスポンジハニカム)、合成スキャフォールドとしてハイドロゲル (TrueGel3D)、ハイドロスキャフォールド (BIOMIMESYS）の3種を選定した。ブラック96wellプレートガラスにスキャフォールドを配置し、ヒト脂肪前駆細胞を播種し、1, 2, 3週の培養後に脂肪細胞蛍光染色(BODIPY)で脂肪分化、脂肪細胞数を共焦点レーザー顕微鏡TCS SP8で評価した。別の96wellプレートガラスにも細胞を播種し、その培養上清についてAdipoRed アッセイにより細胞内トリグリセリドの定量（1, 2, 3週目）を蛍光プレートリーダーOPTIMA-6で行うことで脂肪細胞への分化を定量評価した。
【研究2：リンパ漏モデルの作成】マウス背部切開から胸管を露出し、シリコンマイクロチューブを留置して背部皮下へリンパ液を誘導するべく、予備実験としてマウスでの胸管露出を行った。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
コロナ禍で実験室の制限もあったが、研究1の各種スキャフォールドでの脂肪前駆細胞培養では3種のスキャフォールドの比較実験ができたため、予定通りである。一方、研究2の動物実験については条件設定、物品選定と予備実験のみしかできておらず、進行が遅れている。
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| 今後の研究の推進方策 |
研究1ではスキャフォールドの特徴が分かり、培養手法の目処がついた。今後はスキャフォールドの種類を絞り、条件を変更するなどして脂肪増生の最適化を図る。一方、研究２では胸管へのシリコンマイクロチューブを留置して背部皮下へリンパ液を誘導、同部にスキャフォールド設置、疑似陰圧装置設置を進める。その後に【研究3：耐圧モデルによる比較実験】に進み、植え込み術後の脂肪増生効果を以下の3群で評価する。1. スキャフォールド植え込みのみ 2. スキャフォールド＋疑似陰圧ドーム 3. スキャフォールド＋疑似陰圧ドーム＋リンパ液誘導
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| 次年度使用額が生じた理由 |
実験がやや遅れており、細胞や抗体の購入が少なかったためである。次年度は動物実験も本格化するため、支出が増える見込みである。
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