| 研究課題/領域番号 |
21K09806
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| 研究機関 | 東海大学 |
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研究代表者 |
今川 孝太郎 東海大学, 医学部, 講師 (50366001)
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| 研究分担者 |
増田 治史 東海大学, 医学部, 准教授 (50278496)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| キーワード | NETs / バトロキソビン / 皮弁虚血再灌流モデル / 難治性皮膚潰瘍 |
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| 研究実績の概要 |
本研究は１．慢性創傷でのNETｓ発現の検討と２．動物モデルによるバトロキソビンのNETｓ抑制効果の検証を行うものである。
１．慢性創傷でのNETｓ発現についての検討
２０２１年度に虚血性潰瘍、褥瘡４例について壊死部と健常部の境界から組織を採取したものを、NETｓ発現の確認としてカルプロテクチン（S100A8）染色、ミエロペルオキシダー染色を施行した。肉眼的に炎症の強い症例にNETｓの集積が認められ、局所の炎症が強い部位が組織壊死へ伸展する可能性が示唆された。
２．バトロキソビンのNETｓ抑制効果の検証
動物実験はSD雄性ラット２４匹にて検討する予定である。ラットの腹部に5x3cmの浅腹壁動静脈を茎とする皮弁を挙上し、血管茎をクリップで６時間クランプした後に血流を再開させる皮弁虚血再灌流モデルを使用した。血管クランプ解除時、２４時間後にバトロキソビン30バトロキソビン単位/kgを腹腔内投与し（コントロール群は生理食塩水を腹腔内投与）、皮弁虚血再灌流後の壊死抑制効果を肉眼的および組織学的に検証する。２０２２年度は先行実験として６匹に対して施行した。評価は再灌流後７日目の変化を確認した。肉眼的評価評価として、レーザードップラー血流イメージング（LDI; Moor Instruments, Ltd., Devon, UK）を用いて皮弁の生存範囲を可視化した。組織学的評価としてカルプロテクチン（S100A8）染色、ミエロペルオキシダー染色によるNETｓ発現、血管との関連としてCD31染色を行った。現在、皮弁血流の測定データは、Moor LDI Main software (Laser Doppler Imager ver 5.3; Moor Instruments, Ltd.)を用いて解析、組織標本を作製中である。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
組織採取する症例が少なく計画よりやや遅れているものの、想定外の事象が生じていることはないため、研究計画に変更はなくすすめることが可能と考えている。
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| 今後の研究の推進方策 |
１．慢性創傷でのNETｓ発現の検討は１５例について検討する予定であるが、２０２３年度は残りの１１例につい検体採取、組織染色を施行する予定である。
２．バトロキソビンのNETｓ抑制効果の検証
２０２３年度は残りの１８匹について動物実験を行う予定である。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
２０２２年度の実験動物の購入数を予定よりも少なくしたため、次年度に使用する計画とした。
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