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2023 年度 実施状況報告書

新規軟骨老化促進因子CCN3の加齢に伴った発現誘導と細胞周期停止機構の解明

研究課題

研究課題/領域番号 21K09815
研究機関岡山大学

研究代表者

服部 高子  岡山大学, 医歯薬学域, 助教 (00228488)

研究分担者 久保田 聡  岡山大学, 医歯薬学域, 教授 (90221936)
西田 崇  岡山大学, 医歯薬学域, 准教授 (30322233)
高江洲 かずみ (河田かずみ)  岡山大学, 医歯薬学域, 助教 (10457228)
研究期間 (年度) 2021-04-01 – 2025-03-31
キーワード変形性股関節症 / RNA-Seq
研究実績の概要

変形性関節症(OA)の発症機構を解明する目的で、以下の結果を得た。
①OAによる人工関節置換手術(OA群)と大腿骨頭骨折(正常群)によって得られた患者由来の大腿骨頭軟骨組織から初代培養軟骨細胞を調製し、回収した16サンプルのRNAを用いてRNA-seqを行い、遺伝子の網羅的発現解析を行った。昨年度までの実績で荷重の有無と遺伝子発現に有意な差が観察されなかったことから、荷重の有無は考慮されなかった。Differentially Expressed Genes (DEGs) 解析より262 の遺伝子の発現の違いが観察され、67遺伝子がOA群で有意に発現上昇しており、195遺伝子がOA群で発現低下していた。Over Representation Test では、「ossification」や「regulation of cellular component size」に区分される 遺伝子群がOA群で発現上昇しており、一方で「response to peptide hormone」や「response to lipopolysaccharide」遺伝子群がOA群で発現低下していた。
②これらの結果をもとに幾つかの遺伝子について定量RT-PCRによって遺伝子発現の変化を確認した。
③患者組織標本を用いた免疫染色で、軟骨組織の染色、OA群と正常群との染色性の違いを確認した。
④マウスOAモデルを作製し、継時的にOAが形成されることをμCTおよび組織化学的解析によって確認し、また、軟骨組織より直接RNAを回収し、遺伝子発現の変化が再現されることを確認した。
以上の結果を国際科学情報誌に投稿するための準備を現在行っている。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

本年度はRNA-seqによる網羅的遺伝子発現を行うことを当初から計画しており、順調に解析が進んでいることから「おおむね順調に進展している」とした。現在論文投稿のための準備中ではあるが、本研究課題の期間を超えての投稿になるため、「おおむね順調」と判断した。論文投稿のための経費を次年度に使用するため、経費を繰り越した。

今後の研究の推進方策

先に記述した通り、現在成果をまとめ、国際情報誌に発信する予定である。

次年度使用額が生じた理由

現在作成中の論文の英文校正、投稿のための経費が必要とされるため、次年度に繰り越すこととした。

  • 研究成果

    (5件)

すべて 2023

すべて 学会発表 (5件)

  • [学会発表] 軟骨組織におけるCCN3の老化マーカーとしての役割と、CCN3の異所性発現による加齢様退行性変化の促進2023

    • 著者名/発表者名
      桑原実穂、廣瀬一樹、近藤 星、古松毅之、中田英二、原 哲也、久保田聡、服部高子
    • 学会等名
      第55回日本結合組織学会
  • [学会発表] CCN3は軟骨細胞老化マーカーであり、年齢、荷重の有無に関わらず変形性関節症と相関する2023

    • 著者名/発表者名
      服部高子、滝川正春、久保田聡
    • 学会等名
      第65回歯科基礎医学会
  • [学会発表] 軟骨組織の加齢とともに発現が上昇するCCN3は、その発現上昇と軟骨変性度が年齢、荷重の有無に関わらず相関する2023

    • 著者名/発表者名
      桑原実穂、廣瀬一樹、近藤 星、Fu Shanqi、大野充昭、古松毅之、中田英二、滝川正春、久保田聡、〇服部 高子
    • 学会等名
      第96回日本生化学会
  • [学会発表] 軟骨組織においてCCN3の発現上昇は、年齢、荷重の有無に関わらず軟骨変性度と相関する2023

    • 著者名/発表者名
      桑原 実穂, 廣瀬一樹, 近藤 星, Fu Shanqi, 大野 充昭, 古松 毅之, 中田 英二, 滝川 正春, 久保田 聡, 服部 高子
    • 学会等名
      第46回日本分子生物学会
  • [学会発表] 股関節における変形性股関節症関連遺伝子の網羅的解析2023

    • 著者名/発表者名
      奥田龍一郎、廣瀬一樹、中田英二、鉄永智紀、山田和希、小浦 卓、井上智博、滝川正春、尾崎敏文、久保田聡、服部高子
    • 学会等名
      第36回日本軟骨代謝学会

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公開日: 2024-12-25  

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