| 研究課題/領域番号 |
21K09816
|
|---|
| 研究機関 | 広島大学 |
|---|
研究代表者 |
河野 尚平 広島大学, 医系科学研究科(歯), 助教 (00868391)
|
|---|
| 研究分担者 |
新飯田 俊平 国立研究開発法人国立長寿医療研究センター, 研究所, 研究所長 (10137630)
吉子 裕二 広島大学, 医系科学研究科(歯), 教授 (20263709)
南崎 朋子 広島大学, 医系科学研究科(歯), 助教 (30452593)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
|
| キーワード | 血管異所性石灰化 / 血管平滑筋 / 骨芽細胞 / RNAシーケンシング / イノシトールリン酸 |
|---|
| 研究実績の概要 |
腎性骨症に代表される骨ミネラル代謝異常がみられる病態においては、骨量・骨質の低下とは対照的に、軟部組織の石灰化が惹起される。血管異所性石灰化は慢性腎不全患者において頻発し、予後不良因子となる。血管石灰化は骨芽細胞形成と共通のメカニズムと軟部組織に特有のメカニズムを有すと想定されており、骨形成を損なうことなく血管石灰化を抑制するためには、血管平滑筋に特有の石灰化メカニズムを解明することが必須である。
イノシトール６リン酸（IP6）はハイドロキシアパタイト結晶に結合し、その成長を阻害することから血管石灰化治療薬として期待されているが、ハイドロキシアパタイト成長阻害を作用機序とすると硬組織の骨化をも阻害してしまう危険性が否定できない。IP6は細胞膜透過性は低いが、飲作用によりその一部が細胞内に取り込まれることが知られている。
我々が新規に開発した膜透過型IP6（IP6-AM）は石灰化を阻害することを実証した。またIP6は骨芽細胞前駆細胞株KUSA-A1の石灰化を阻害したが、IP6-AMはその石灰化を抑制しなかった。さらに細胞内IP6代謝酵素の遺伝子発現を解析した結果、MOVASではIP6リン酸化酵素群が高発現している一方、KUSA-A1ではIP6脱リン酸化酵素が高発現しており、それぞれの細胞において細胞内IP6代謝が異なることが示唆された。MOVASの石灰化誘導２－３日で平滑筋マーカー遺伝子の低下と石灰化関連遺伝子の増加が確認されたので、石灰化誘導後３日のRNAサンプルを作製した。
|
| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
RNAシーケンシングサンプルの条件検討を完了し、サンプルを調製した。また、血管平滑筋細胞と骨芽細胞において細胞内IP6代謝が異なる可能性を示唆するデータを得た。
|
| 今後の研究の推進方策 |
IP6, IP6-AMを投与し３日間石灰化誘導したMOVASから抽出したRNAをRNAシーケンシングし、IP6-AM投与で特異的に変動する或いはIP6-AM投与でのみ石灰化誘導による発現変動が消失する遺伝子群を同定する。その遺伝子群をノックアウト或いはノックダウンしたMOVASを作製し、石灰化への影響を評価する。MOVASの石灰化に影響がみられた遺伝子群がKUSA-A1石灰化に影響するか確認し、細胞血管平滑筋細胞の石灰化特異的に作用する遺伝子を同定する。
|
| 次年度使用額が生じた理由 |
RNAシーケンシング委託が未完了のため次年度に完了、費用支出予定である。
|
