転移性口腔癌細胞を用いた鶏卵漿尿膜移植法の確立と治療標的分子の同定

2023 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 21K09862
• 研究機関: 藤田医科大学
• 研究代表者: 櫻井 浩平 藤田医科大学, 医学部, 講師 (10608756)
• 研究分担者: 酒井 康弘 藤田医科大学, 医学部, 講師 (20754394) ; 山田 勢至 藤田医科大学, 医学部, 准教授 (00566870) ; 林 雄一郎 横浜市立大学, 医学研究科, 客員研究員 (80806464)
• 研究期間 (年度): 2021-04-01 – 2024-03-31
• キーワード: 口腔癌 / 転移 / 鶏卵漿尿膜移植法 / 遺伝子発現

研究実績の概要

転移は口腔癌の予後不良因子である。多段階からなるステップを経て成立する転移を解析するためには、適切な「癌細胞モデル」と「動物実験モデル」が必要である。本研究は癌細胞モデルとして高転移能を有する口腔癌細胞株を使用し、転移に関与する遺伝子の発現・ネットワークを解析する。また動物実験モデルとして、鶏卵漿尿膜移植法（Chorioallantoic Membrane Assay: CAM assay）を確立する。本研究の目的は、これらの癌細胞モデルと動物実験モデルを組み合わせて口腔癌転移の治療標的分子を同定することである。
癌細胞は転移の過程で脈管に侵入すると足場との接着を失って、脈管内では浮遊状態となる。浮遊状態のストレスに耐えることができる癌細胞が遠隔臓器へ到達すると考えられる。そこで本年度は浮遊状態に適応した口腔癌細胞を樹立することを目指した。口腔癌細胞株HSC-3を低接着プレートで培養し、生存した細胞のみ選択して樹立した細胞をHSC-3-S5細胞と名付けた。HSC-3細胞とHSC-3-S5細胞のトランスクリプトームを比較すると、HSC-3-S5細胞で転移や幹細胞に関わる遺伝子の発現が増加していることが明らかになった。
前年度まではHSC-3細胞からin vivo screeningで樹立された高転移能株HSC-3-M3細胞を用いて鶏卵漿尿膜移植法を行っていたが、鶏卵漿尿膜移植法での転移が確認されなかった。本年度はHSC-3-M3細胞に加えHSC-3-S5細胞を用いて転移能の評価を行っている。また漿尿膜上への細胞移植だけでなく、血管内へ癌細胞を直接移植する方法も確立した。

研究成果

• [雑誌論文] Multifaced roles of the long non-coding RNA DRAIC in cancer progression (2024)
  • 著者名/発表者名: Sakurai K, Ito H.
  • 雑誌名: Life Sciences 巻: 343 ページ: 1-13
  • DOI: 10.1016/j.lfs.2024.122544
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] H19 in serum extracellular vesicles reflects resistance to AR axis-targeted therapy among CRPC patients (2023)
  • 著者名/発表者名: Kato T, Kawakami K, Mizutani K, Ando T, Sakai Y, Sakurai K, Toyota S, Ehara H, Ito H, Ito M.
  • 雑誌名: Cancer Genomics & Proteomics 巻: 20 ページ: 456-468
  • DOI: 10.21873/cgp.20397
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Transcriptome of oral cancer cells adapted to suspension culture is potentially related to cancer progressive phenotypes (2023)
  • 著者名/発表者名: Sakurai K, Ando T, Ideta Y, Hayashi Y, Baba J, Mitsudo K, Ito H.
  • 雑誌名: Anticancer Research 巻: 43 ページ: 3905-3991
  • DOI: 10.21873/anticanres.16578
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Marked intestinal trans-differentiation by autoimmune gastritis along with ectopic pancreatic and pulmonary trans-differentiation (2023)
  • 著者名/発表者名: Takeuchi C, Sato J, Yamamichi N, Kageyama-Yahara N, Sasaki A, Akahane T, Aoki R, Nakajima S, Ito M, Yamamichi M, Liu Y, Sakuma N, Takahashi Y, Sakaguchi Y, Tsuji Y, Sakurai K, Tomida S, Niimi K, Ushijima T, Fujishiro M.
  • 雑誌名: Journal of Gastroenterology 巻: 59 ページ: 95-108
  • DOI: 10.1007/s00535-023-02055-x
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Chromogenic in situ hybridization reveals specific expression pattern of long non-coding RNA DRAIC in formalin-fixed paraffin-embedded specimen (2023)
  • 著者名/発表者名: Sakurai K, Yamada S, Ito R, Ochiai M, Ando T, Sakai Y, Kato T, Ito H.
  • 雑誌名: Non-coding RNA Research 巻: 9 ページ: 76-83
  • DOI: 10.1016/j.ncrna.2023.11.004
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [学会発表] 足場非依存的な癌細胞クラスター形成を制御する分子機構の解析 (2023)
  • 著者名/発表者名: 永井徳、櫻井浩平、酒井康弘、安藤達也、加藤卓、伊藤弘康
  • 学会等名: 日本病理学会総会