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2023 年度 実績報告書

糖尿病関連歯周炎における歯周組織細胞由来エクソソームの総合的研究

研究課題

研究課題/領域番号 21K09895
研究機関徳島大学

研究代表者

生田 貴久  徳島大学, 大学院医歯薬学研究部(歯学域), 助教 (00746563)

研究分担者 木戸 淳一  徳島大学, 大学院医歯薬学研究部(歯学域), 准教授 (10195315) [辞退]
稲垣 裕司  徳島大学, 病院, 講師 (50380019)
湯本 浩通  徳島大学, 大学院医歯薬学研究部(歯学域), 教授 (60284303)
廣島 佑香  徳島大学, 大学院医歯薬学研究部(歯学域), 講師 (60545143)
木戸 理恵  徳島大学, 病院, 助教 (60876027)
研究期間 (年度) 2021-04-01 – 2024-03-31
キーワードエキソソーム / 糖尿病関連歯周炎 / 高グルコース / 歯周医学 / 炎症反応 / サイトカイン / 歯根膜線維芽細胞 / 歯肉上皮細胞
研究実績の概要

昨年度までに通常のグルコース濃度での培養条件の他に,糖尿病合併症研究で用いられる高グルコース条件下での培養,さらには高グルコース下での浸透圧に調整した培養条件下で培養したヒト歯根膜線維芽細胞よりPureExome(R) Isolation kitを用いて抽出したエクソソーム(エキソソームマーカー確認済: 10 μg/mL)を用いてヒト歯根膜線維芽細胞を刺激して,24時間と48時間後の炎症性サイトカインの産生について,それぞれサイトカインアレイ(Periodontal Disease Array C1:RayBiotech,Inc.)とELISAにて解析を行った結果,高グルコース条件下において,炎症性サイトカインであるIL-6とIL-8の産生が増強する傾向が認められた。
また,ヒト歯肉上皮細胞株SBA-9を通常のグルコース濃度での培養条件の他に,糖尿病合併症研究で用いられる高グルコース条件下での培養,さらには高グルコース下での浸透圧に調整した培養条件下し,エクソソームを抽出した結果,いずれも100 nm前後の粒子径であることが確認できた。エキソソーム抽出に関して,細胞外小胞結合ビーズを用いたAffinityによる方法(MagCaptureExosome Isolation Kit PS Ver.2)についても検討を行った。また,抽出したエキソソーム粒子数は,1.18 x 108~1.5 x 1014/mLの範囲であり,現在,より効率的なエキソソームの抽出法を検討し,さらに,細胞刺激に際しては,タンパク当たりでの調整に加えて,粒子数で調整する方法を検討し,解析中である。

  • 研究成果

    (3件)

すべて 2023

すべて 学会発表 (3件) (うち国際学会 1件)

  • [学会発表] 人工合成したSecretory leukocyte protease inhibitorの抗菌活性とリポソーム封入2023

    • 著者名/発表者名
      木戸理恵,廣島佑香,木戸淳一,吉田賀弥,生田貴久,湯本浩通
    • 学会等名
      第66回春季日本歯周病学会学術大会
  • [学会発表] 休眠状態の脂肪組織由来間葉系幹細胞による細胞老化随伴分泌現象の解除と糖尿病性合併症治療への応用の可能性2023

    • 著者名/発表者名
      船木真理,秦明子,吉田光輝,宮本直輝,生田貴久,植村勇太,秋月皆人,丹黒章,湯本浩通,小川博久,尾矢剛志
    • 学会等名
      第66回日本糖尿病学会年次学術集会
  • [学会発表] Quiescence Recovers Adipose Tissue-Derived Stromal Cells from Senescence-Associated Secretory Phenotype, Leading to Enhanced Angiogenesis and Diabetic Wound Healing2023

    • 著者名/発表者名
      Makoto Funaki, Akiko Hata, Mitsuteru Yoshida, Naoki Miyamoto, Takahisa Ikuta, Yuta Uemura, Minato Akizuki, Akira Tangoku, Hiromichi Yumoto, Hirohisa Ogawa, Takeshi Oya
    • 学会等名
      83nd Scientific Sessions presented by the American Diabetes Association
    • 国際学会

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公開日: 2024-12-25  

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