| 研究課題/領域番号 |
21K09896
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| 研究機関 | 徳島大学 |
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研究代表者 |
湯本 浩通 徳島大学, 大学院医歯薬学研究部(歯学域), 教授 (60284303)
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| 研究分担者 |
木戸 淳一 徳島大学, 大学院医歯薬学研究部(歯学域), 准教授 (10195315) [辞退]
稲垣 裕司 徳島大学, 病院, 講師 (50380019)
廣島 佑香 徳島大学, 大学院医歯薬学研究部(歯学域), 講師 (60545143)
尾崎 和美 徳島大学, 大学院医歯薬学研究部(歯学域), 教授 (90214121)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| キーワード | Outer Membrane Vesicle / 歯肉上皮細胞 / 細胞間接着分子 / gingipain / 骨芽細胞 / 石灰化 / RANKL / OPG |
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| 研究実績の概要 |
歯周病原細菌Porphyromonas gingivalis (Pg)やFusobacterium nucleatum (Fn)由来Outer Membrane Vesicle (OMV) のヒト歯肉上皮細胞における細胞間接着分子に及ぼす影響：E-cadherinとClaidin-1の蛋白発現レベルについて，Westerrn blot法で解析した結果，OMVs添加後24時間でControlと比較すると，Wild-type由来Pg-OMVsでは蛋白発現の減少を認めたが，gingipain欠損株由来PgKDP-OMVs，線毛欠損株由来PgMPG1‐OMVやFn-OMVでは蛋白発現の減少は認められなかった。また，mRNA発現レベルについてreal-time PCRにて解析した結果，Controlと比較して，エンドトキシン活性100 ng/ml相当のPg-OMVs，Pg KDP-OMVs，PgMPG1‐OMV，Pg- LPS，Fn‐OMVの添加後12，24時間では，E-cadherinとClaudin-1共に遺伝子発現レベルに有意差は認められなかった。以上より，Pg-OMVsに含まれるgingipainが，ヒト歯肉上皮細胞においてE-cadherin及びclaudin-1を分解する可能性が示唆された。
Pg-OMVsの骨芽細胞に対する影響：Pg-OMVsは，150 ng/mL以上の濃度で，ラット骨芽細胞様細胞株MC3T3-E1細胞の生存率を有意に低下させた。また，Pg-OMVsは，濃度依存的にmRNAレベルとタンパクレベル共にRANKLの発現上昇とOPGの発現低下を誘導した。さらに，Pg-OMVsは，濃度依存的にALP活性を低下させ，骨様結節形成も抑制した。以上より，Pg-OMVsは，骨芽細胞のRANKL発現上昇とOPG発現やALP活性低下により，石灰化を抑制することが示唆された。
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