研究課題/領域番号 |
21K10396
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研究機関 | 九州保健福祉大学 |
研究代表者 |
松葉 隆司 九州保健福祉大学, 薬学部, 教授 (20304206)
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研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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キーワード | 結核菌 / 病原因子 / 変異 |
研究実績の概要 |
結核菌は遺伝子レベルの違いによって8つの系統株に分類されている。これらの結核菌系統株のなかでも日本を含む東アジア地域に蔓延し、世界各地でアウトブレーク原因となる株に対しては、有効な予防や治療対策がない。また、このような結核菌株に特有な性状を付与する原因因子やそれら因子による効果についても明らかにされていない。遺伝子系統株特異的な変異をもつ遺伝子群は、各遺伝子産物機能活性の亢進、低下あるいは機能不全が変異によって生じる可能性があるため、単独あるいは複合的な効果として結核菌の高病原性化や薬剤耐性化に関連しているのかもしれない。本年度は、系統株間で異なる病原性状を生み出す可能性ある遺伝子変異群に関して、変異を持つ遺伝子と変異のない遺伝子から各タンパクを産生する組換え大腸菌を遺伝子組換え実験により作出した。各組換えタンパクの発現については、菌抽出液を電気泳動法およびタグ抗体を用いたウエスタンブロット法による確認を試みた。しかしながら、大腸菌組換え発現系での各タンパク発現は、いづれのクローンにおいても認められなかった。そこで、大腸菌組換えタンパクとしての発現が認められない場合に有効とされるベクターや発現宿主となる大腸菌株を用いたタンパク発現系での試みを行なったが、タンパク発現は同様に認められなかった。目的とする結核菌タンパク群は、マイコバクテリアによる組換えタンパク発現系が必要と考えられた。 今後は、マイコバクテリア組換えタンパク発現系ベクターにクローニングし解析を試みる。
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現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
4: 遅れている
理由
研究遂行に必要な結核菌タンパク群が複数の大腸菌遺伝子組換え系で、いづれも認められなかったため。
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今後の研究の推進方策 |
マイコバクテリア組換えタンパク発現系でのクローニングにより解析を試みる。
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次年度使用額が生じた理由 |
小額残金のため繰越とし、次年度予算に合算して使用する予定。
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