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2023 年度 実績報告書

脊髄虚血-再潅流障害に対する微小重力培養間葉系幹細胞の毛細血管への影響

研究課題

研究課題/領域番号 21K11240
研究機関広島大学

研究代表者

黒瀬 智之  広島大学, 医系科学研究科(保), 助教 (20363054)

研究期間 (年度) 2021-04-01 – 2024-03-31
キーワード虚血-再潅流障害 / 脊髄損傷 / 間葉系幹細胞 / 毛細血管開通 / 血管内皮細胞 / アポトーシス
研究実績の概要

雄性SDラットの左大腿動脈から挿入したバルーンカテーテルを膨らませて脊髄を虚血した.再潅流直後に,PBSか骨髄由来MSCを注入した.血管内皮と結合するトマトレクチンを注射し,脊髄を採取した.凍結横断切片を作製し,血管は抗PECAM-1抗体で,血流の有無はトマトレクチンに対する染色で,二重標識した.
虚血-再潅流後,運動機能が著しく低下したが,MSCを移植した群では徐々に改善した.虚血-再潅流から1日後,開通している毛細血管が減少しており、3日後の開通毛細血管はさらに減少し,血流低下が持続したと考えられる。MSC投与による改善は僅かであった.
5週齢のSDラットから脊髄を採取し、血管内皮細胞を分離して培養した。培養血管内皮細胞に対して、過酸化水素添加やアポトーシス誘導剤添加、低栄養環境での培養を行い、アポトーシスを誘導した。MSCをPKH 67で染色後に、アポトーシス誘導後の内皮細胞培養環境に加えて共培養を行った。24時間後、72時間後に細胞を回収し、トマトレクチンで血管内皮細胞を染め、Annexin Vを用いてアポトーシス細胞を染めてフローサイトメトリーで解析した。
アポトーシス誘導後の培養血管内皮細胞は、いずれの条件下でも生存率が低下し、アポトーシスを起こした細胞の比率が増加した。MSCを添加した共培養により、低栄養環境における血管内皮細胞の生存比率が増加し、アポトーシスの比率が減少した。これは、MSCが血管内皮細胞のアポトーシスを抑制することを示唆する。
損傷した中枢神経系組織において、移植したMSCが血流へ影響を及ぼしはしなかったが、損傷部付近における血管内皮の維持に貢献することが示唆された。

  • 研究成果

    (5件)

すべて 2023

すべて 学会発表 (5件) (うち国際学会 1件、 招待講演 1件)

  • [学会発表] 虚血-再潅流障害モデルラットの損傷脊髄における毛細血管への間葉系幹細胞の影響2023

    • 著者名/発表者名
      黒瀬 智之
    • 学会等名
      第28回日本基礎理学療法学会学術大会
  • [学会発表] 脳卒中の運動機能障害に対する再生医療2023

    • 著者名/発表者名
      黒瀬 智之
    • 学会等名
      第5回日本再生医療とリハビリテーション学会
    • 招待講演
  • [学会発表] 脳損傷マウスの運動機能改善に対する間葉系幹細胞移植およびエクソソームの投与効果の比較2023

    • 著者名/発表者名
      徐 敏慧, 寺西 正貴, MD SALIMUL KARIM, 中川 慧, 黒瀬智之,弓削 類
    • 学会等名
      第5回日本再生医療とリハビリテーション学会
  • [学会発表] 低栄養・低酸素環境が間葉系幹細胞に及ぼす影響2023

    • 著者名/発表者名
      岩瀬 輝,黒瀬智之,山尾愛士,中川 慧,寺西正貴,弓削 類
    • 学会等名
      第5回日本再生医療とリハビリテーション学会
  • [学会発表] TRANSPLANTATION OF HUMAN CRANIAL BONE-DERIVED MESENCHYMAL STEM CELLS AND REHABILITATION ENHANCE MOTOR FUNCTIONAL RECOVERY IN MICE AFTER TRAUMATIC BRAIN INJURY2023

    • 著者名/発表者名
      Md. Salimul Karim, Takeshi Imura, Tomoyuki Kurose, Kei Nakagawa, Yumi Kawahara , and Louis Yuge
    • 学会等名
      the annual meeting of International Society for Stem Cell Research
    • 国際学会

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公開日: 2024-12-25  

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