| 研究課題/領域番号 |
21K11668
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| 研究機関 | 筑波大学 |
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研究代表者 |
山縣 憲司 筑波大学, 医学医療系, 准教授 (00420084)
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| 研究分担者 |
鈴木 英雄 筑波大学, 医学医療系, 准教授 (00400672)
内田 文彦 筑波大学, 医学医療系, 講師 (70736008)
岡田 浩介 筑波大学, 医学医療系, 准教授 (80757526)
正田 純一 筑波大学, 医学医療系, 客員教授 (90241827)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| キーワード | NASH / 歯周病菌 / Oral-Gut-Liver axis / Nrf2 / 遺伝子改変マウス |
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| 研究実績の概要 |
歯周病原菌のリポ多糖（LPS）は，腸肝連関を介してNASHの発症進展に関与する．酸化ストレス防御の司令塔Nrf2がNASHを防御することを報告したが，Nrf2は肝細胞における酸化ストレス消去のほか，小腸のバリア機能，Kupffer細胞の貪食能にも重要な役割を果たす．Nrf2は，P.gとそのLPSに対しても防御機能を果たすことが推測されるが，全身Nrf2遺伝子欠失マウス（Nrf2-KO）を用いた解析では，組織細胞ごとのNrf2の機能解明は困難である．本研究は，Kupffer細胞を含むマクロファージのみにNrf2を発現するマクロファージ特異的Nrf2遺伝子レスキューマウス（Nrf2 m-res）を作製・解析し，歯周病原菌のLPSが誘導するNASHにおけるマクロファージのNrf2の役割を明らかにすることを目的とする．
Nrf2 m-resをCre-loxPシステムを用いて作製した．雄性5週齢のNrf2-KO，Nrf2 m-res，野生型マウス（WT）に高脂肪食を17週間摂餌させ，後半6週間にP.g 由来LPS（0.3mg/kg）を週２回腹腔内投与してNASHを誘導した．23週齢でと殺し，体組成，肝病理評価，肝組織qPCRによりNASH病態を比較解析した．
Nrf2-KOはWTと比べ肝炎症および線維化が有意に高度であったが，Nrf2 m-resではそれらが改善した．肝組織のqPCR解析でも，Nrf2-KOはWTと比べ炎症性サイトカインIl-1β，Tlr2と肝線維化促進因子Tgfβ1の発現が有意に増加したが，Nrf2 m-resでは減少する傾向が認められた．
Kupffer細胞を含むマクロファージのNrf2は，当該NASHモデルの肝炎症と線維化の進行を抑止した．歯周病原菌由来のLPSが誘導するNASHの進展において，マクロファージのNrf2は重要な防御因子と考えられる．
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
高脂肪食摂餌とP.g 菌由来LPS投与によるNASHモデルにおいて，Nrf2の欠失は肥満とインスリン抵抗性を介さずにNASHの炎症線維化を悪化させた．歯周病原菌を原因とするNASHにおいてNrf2は防御的に機能し，新規治療標的と成り得ると考えられた．
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| 今後の研究の推進方策 |
Nrf2-KOをベースに作製したKupffer細胞を含むマクロファージのみにNrf2を発現するマクロファージ特異的Nrf2遺伝子レスキューマウス（Nrf2 m-res）では，NASHの表現型が改善することが判明した．今後は，マクロファージにおけるNrf2の果たす役割に着目して，臓器特異的なNrf2の役割解析を進める予定である．
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| 次年度使用額が生じた理由 |
研究試薬の納品が遅延したため．
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