| 研究課題/領域番号 |
21K15096
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| 研究機関 | 国立研究開発法人理化学研究所 |
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研究代表者 |
加藤 孝信 国立研究開発法人理化学研究所, 生命機能科学研究センター, 基礎科学特別研究員 (80844935)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| キーワード | 一次繊毛 / シグナル制御 / メカノセンサー / カルシウムイメージング / プロテオミクス |
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| 研究実績の概要 |
細胞から伸びたアンテナのような小器官である一次繊毛は、細胞外環境を感知するセンサーとしてはたらく。これまでの研究から、細胞外の流れ刺激に対して繊毛内でカルシウム応答が見られることは知られていたが、その下流のシグナルカスケードに関しては未解明な点が多い。本研究課題では、この一次繊毛というアンテナが、どのように細胞に情報を伝達し、制御するのかを明らかにすることを目的とした。
昨年度に構築した「フローチャンバーを用いて腎臓由来の培養細胞に細胞外流れ刺激を与える系」を用いて、今年度は「繊毛の中で細胞外流れ刺激によってどのようなタンパク質の増減やリン酸化修飾が起きるのか」を知るために、繊毛内プロテオーム解析系を立ち上げた。すでに予備的な結果を得ており、来年度はこうした候補遺伝子の詳細な解析に進む予定である。
特にこうした詳細な解析を行うのに必須な、繊毛内での分子コンバータ因子の動態解析で必要な光路の構築を開始しており、次年度に計画している観察に向けて順調に準備を進めることが出来た。
またこの研究を進める中で、マウス初期胚のノードの一次繊毛 (マウスノード不動繊毛) において、繊毛内のタンパク質局在に異方性があり、繊毛が曲げられる向きを感知している可能性があるという驚くべき結果を得た (Katoh et al., Science, 2023)。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
1: 当初の計画以上に進展している
理由
申請書の研究計画通りに順調に研究を進めており、「培養細胞にフローを与えるハイスループットシステムを用いた分子コンバータ関連の候補因子スクリーニング」を用いたスクリーニングを開始することが出来た。また、繊毛内での分子コンバータ因子の動態解析に関しても順調に準備を進めている。
また一方で、この研究を進める中で、この研究計画では想定していなかったマウスノード不動繊毛において「さらに繊毛の力学情報受容に繊毛の極性が効いている」という思いもよらない偶発的な発見があり、以前の研究結果とあわせて論文投稿を行うことが出来た。さらにその繊毛の極性制御を行っているメカニズムに関しても手掛かりを得つつあり、これらを総合的に評価すると、当初計画していた以上にインパクトのある結果となり、想定以上の進展と評価することが出来る。
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| 今後の研究の推進方策 |
今後は申請書の研究計画通りに「分子コンバータ関連の候補因子スクリーニング」の結果の解析と「繊毛内での分子コンバータ因子の動態解析」を完了させることを目指す。これにより、細胞外流れ刺激によって、繊毛内でどのようなタンパク質の増減やリン酸化修飾が起きるのかを初めて明らかにすることが出来る見込みである。他方、マウスノード不動繊毛の実験に関しても、繊毛内極性を生み出すメカニズムについて引き続き探っていくことを予定している。
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