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ゲノム編集技術を駆使して、CYP3A4・UGT1A1安定発現Caco-2細胞およびCYP3A4・UGT1A1*6安定発現Caco-2 細胞を作製した。CYP3A4・UGT1A1安定発現Caco-2細胞およびCYP3A4・UGT1A1*6安定発現Caco-2 細胞の薬物代謝能が、ヒト小腸と比べてどの程度の活性を有しているのか、ヒト小腸S9をポジティブコントロールとして用いて評価した。CYP3A4の活性をミダゾラムの代謝物である1-OH ミダゾラムを指標に評価した。その結果、WT-Caco-2細胞のS9では、1-OH ミダゾラムは検出できなかった。一方で、CYP3A4・UGT1A1安定発現Caco-2細胞およびCYP3A4・UGT1A1*6安定発現Caco-2 細胞のS9では、1-OH ミダゾラムを検出することに成功した。しかしながら、CYP3A4・UGT1A1安定発現Caco-2細胞およびCYP3A4・UGT1A1*6安定発現Caco-2 細胞のS9におけるCYP3A4活性は、ヒト小腸S9と比べ1/10以下であった。次に、UGT1A1の活性をSN-38の代謝物であるSN-38Gを指標に評価した。CYP3A4・UGT1A1安定発現Caco-2細胞のUGT1A1活性は、WT-Caco-2細胞およびCYP3A4・UGT1A1*6安定発現Caco-2 細胞のS9と比べ高い値を示した。CYP3A4・UGT1A1安定発現Caco-2細胞のS9におけるUGT1A1活性は、ヒト小腸S9と同程度であった。
以上の結果より、CYP3A4・UGT1A1安定発現Caco-2細胞のUGT1A1活性はヒト小腸S9に匹敵するものの、CYP3A4活性はヒト小腸S9には劣ることが示唆された。
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