| 研究課題/領域番号 |
21K15363
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| 研究機関 | 山口大学 |
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研究代表者 |
徳永 雅之 山口大学, 大学院医学系研究科, 助教 (10845043)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| キーワード | Arhgap11A |
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| 研究実績の概要 |
細胞外の力学刺激は細胞の増殖・分化を制御する一方で、細胞は適切な細胞外環境を維持する。YAPはこの恒常性維持機構において中心的役割を担うため、YAPメカノホメオスタシスが提唱されている。しかし、細胞外の力学刺激がどうYAPに伝達されるかその詳細は不明である。研究代表者はこれまでの研究から、ARHGAP11AはYAPに直接転写を制御されている一方で、YAP活性を負に制御することを見出している。すなわち、YAPとARHGAP11Aがネガティブフィードバックを形成していることを明らかにしてきた。しかしながら、ARHGAP11Aの生物学的機能は不明な点が多い。そこで、本研究では、ARHGAP11Aの機能と細胞内局在制御について焦点を当て研究を行った。その結果、細胞内局在が細胞外の硬さにより変化することを見出した。また、ARHGAP11Aは細胞質においてメカノセンサーである、1次繊毛形成に関与することを見出した。さらに、硬さを変化させたゲル上で細胞を培養したところ柔らかいゲル上ではARHGAP11Aは細胞質に局在することを見出した。また、ARHGAP11Aのノックダウンにより、細胞増殖が亢進し、１次繊毛形成を抑制する遺伝子の発現増加することが明らかとなった。これらの結果から、ARHGAP11Aは細胞外の硬さにより細胞内局在を変化させ、核から細胞質にその局在が変化すると１次繊毛形成を促進し、細胞増殖の抑制やHippo経路を介したYAP活性の抑制を行うことが示唆される。今後、ARHGAP11Aがどのようにして１次繊毛形成を促進するのか、ARHGAP11Aの細胞内局在を制御する分子について明らかにしていく。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
ARHGAP11Aの細胞内局在を制御する分子の同定を進めているが未だ至っていない。今後はCRISPRを用いたスクリーニングを行い、同定を行う。
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| 今後の研究の推進方策 |
CRISPR用いたスクリーニングを行うためにCas9たんぱく質をAAVS1サイトに導入した。この細胞で遺伝子を網羅的にノックアウトしARHGAP11Aの細胞内局在が変化する分子を探索する。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
次年度使用額として814円生じたが端数だと考えるため特記すべきことなし。
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