| 研究課題/領域番号 |
21K15458
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| 研究機関 | 医療法人さわらび会福祉村病院長寿医学研究所 |
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研究代表者 |
中嶋 章悟 医療法人さわらび会福祉村病院長寿医学研究所, 長寿医学研究所, 研究員 (90895509)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| キーワード | HBV / ポリメラーゼ / 酵素 / 非核酸系逆転写阻害剤 / 薬剤耐性変異 |
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| 研究実績の概要 |
B型肝炎ウイルス（HBV）ポリメラーゼは、ウイルス性タンパク質のうち唯一酵素活性を有する魅力的な創薬標的である。申請者はすでに共同研究者とともに、DNA伸長活性を有するリコンビナントHBVポリメラーゼの精製に成功し、伸長活性を阻害する非核酸系逆転写阻害剤（NNRTI）を同定した。本研究ではこれまで得ている結果を活かし、HBVポリメラーゼとNNRTIの結合部位や耐性変異機構の解析といった関係解明を目指している。
HBV同様に逆転写酵素を持つヒト免疫不全ウイルス(HIV)では多くのNNRTIが同定（ネビラピン、リルピピリン等）されており、また逆転写酵素との結合ポケットも立体構造から詳細な解析がなされている。これらHIVのNNRTIは共通しない構造をもっているが、1つの共通したポケットに結合することも明らかにされている。これら知見を踏まえHBVのNNRTI結合ポケットは、HIVと同様に共通した1つなのか、それとも化合物構造によって様々な結合ポケットが存在するかなどの関係解明に向けて、本年度はHBVポリメラーゼの変異体解析を試みた。
すなわちHIVにおけるNNRTI結合部位に関与するアミノ酸は既に特定されていることから、HIV RTと同様の位置にあるHBV RTのアミノ酸をアラニンに置換し、それぞれの変異体を作成を行う。現在、細胞トランスフェクション実験系で既に同定済みのNNRTIに対する活性比較を行うため、各種変異体を作成している。
次年度では、引き続きHBVポリメラーゼとNNRTIの結合部位や耐性変異機構の解析を実施予定である。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
当初の予定よりやや遅れているが、既に様々な化合物構造を持つNNRTI候補を多数得ることに成功し、またHBVポリメラーゼの各種変異体を作成を行っているため、次年度にHBVポリメラーゼのNNRTI結合部位解析が可能となっている。これまでの基盤をもとに、次年度の研究を進める。
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| 今後の研究の推進方策 |
これまでの研究成果により様々な化合物構造を持つNNRTI候補を多数得ることに成功したため、次年度ではHBVポリメラーゼとNNRTIの結合部位や耐性変異機構の解析を実施予定である。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
（理由）828545円の未使用額が生じたが、翌年度に使用する事が効率的と考えたため、2023年度に持ち越した。
（使用計画）828545円の未使用額は消耗品購入などにあてる。
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