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2021 年度 実施状況報告書

サルコペニアに対する筋肉由来セクレトームを介した脳梗塞治療の挑戦

研究課題

研究課題/領域番号 21K15632
研究機関順天堂大学

研究代表者

稲葉 俊東  順天堂大学, 大学院医学研究科, 特任助教 (30879672)

研究期間 (年度) 2021-04-01 – 2024-03-31
キーワード脳梗塞モデル / 運動負荷 / 脳保護 / 筋肉由来セクレトーム / ミトコンドリア
研究実績の概要

脳虚血後の機能予後改善の解明の為、神経保護や神経再生に果たす筋肉由来セクレトームの機能解明を目的とする。
CB-17 Icr +/+ miceにトレッドミル運動を施行した運動負荷群と非負荷群に分け各郡にdistal mcaoを行った。Mcao24時間、1週間後に脳梗塞体積や神経兆候(mNSS), 運動評価 (Rota rod試験)を行った。その結果、Mcao24時間後のTTC染色における脳梗塞体積とRota rod試験で有意差を認め、また1週間後のRota rod試験においても有意差を認めたがmNSSにおいては有意差を認めなかった。In vitroにおいては、ラット初代神経培養で生後1日目Wistar ratの前頭葉部分を抽出しニューロンだけを培養した。12well内で培養し成熟した時点で3h OGD(酸素・グルコース欠乏負荷)を施行した。Control群、OGD群、OGD+ミトコンドリア(Mito)群とで行い、Mito投与群は濃度を変えて投与した。検討はウエスタンブロット(WB)法にてタンパク発現 (SMI31, SMI32, MAP2, Neu N)を解析した、その結果Mito濃度依存性でOGD障害が抑制され、また Cell Counting Kit-8にて生細胞数を測定しCytotoxicity LDH Assay Kit-WSTにて細胞傷害を測定したが、こちらもMito濃度依存的に生細胞や細胞障害に有意差を認めた。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

運動負荷の適切条件に苦慮したため。

今後の研究の推進方策

in vivo系においては免疫染色等の組織学的解析やウエスタンブロットにおいてにタンパク質解析とin vitro系では神経培養細胞での軸索進展を考慮したいと考えている。

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公開日: 2022-12-28  

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