| 研究課題/領域番号 |
21K16179
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| 研究機関 | 秋田大学 |
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研究代表者 |
齋藤 雅也 秋田大学, 医学部附属病院, 助教 (00831215)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| キーワード | 好酸球性多発血管炎性肉芽腫症 / 好酸球性炎症 / 細胞外トラップ / 腎障害 |
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| 研究実績の概要 |
本研究は好酸球性多発血管炎性肉芽腫症(EGPA)の腎合併症での好酸球性炎症の寄与について検討し、治療標的となり得るかを探る。EGPAでは様々な臓器における好酸球の非アポトーシス死(ETosis)による臓器障害性が明らかになってきており、また、EGPAの血栓病変の形成にETosisが関与していることが報告されている。その一方で、EGPAの腎障害におけるETosisの関与は未だ明らかとなっていない。
昨年度、今年度で好酸球非アポトーシス細胞死(ETosis)のin vitro条件下での腎組織傷害作用を検討するため、既報に則り活性化した好酸球とHuman kidney-2(HK-2)細胞のインキュベーションによる実験を行っている。尿細管細胞の傷害性についてはHK-2細胞から放出されたLDHやヨウ化プロピジウム染色による視細胞の可視化と解析を行っており、データ解析後に論文化を進める予定となっている。
腎での好酸球ETosisの局在を確認するため、EGPA患者腎組織の電子顕微鏡検査を進めているが、より広範な組織での確認を行うため、パラフィン包埋検体からの電顕包埋切片作成としていたが、観察画像が荒く正確な評価が困難であった。そのため、今後は好酸球ETosisのマーカーによる免疫染色を行うことで腎組織での好酸球ETosisの局在評価を行う予定である。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
腎組織における好酸球ETosisの局在評価のための電子顕微鏡検査で、多数例かつ広範囲での評価は、パラフィン包埋切片での電顕観察がうまくいかない部分があった。代替案としてパラフィン切片での免疫染色を予定している。
研究計画の遅れの原因として新型コロナウイルス感染症による予期しない業務の増加が挙げられる。コロナウイルス感染症患者数は減少しているため、次年度は研究のための時間確保がしやすくなることが予想され、積極的に研究計画を遂行する。
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| 今後の研究の推進方策 |
腎組織での好酸球ETosisの局在評価のための電子顕微鏡検査では、パラフィン切片からの戻し切片のため画像が荒く正確な評価が難しいことが判明した。代替案としてパラフィン切片での免疫染色を予定している。好中球ETosisに関連した腎組織免疫染色は当科の過去の研究でも実績があるため、好酸球ETosisマーカーの免疫染色へ応用することで十分に対応できると考えられる。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
腎組織における好酸球ETosis局在評価のための免疫染色に用いる試薬などが未購入であることや、コロナウイルス感染症による県外移動制限などで次年度使用額が生じている。
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