microRNAとスーパーエンハンサーに着目した悪性リンパ腫のPVT1の役割解明

2021 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 21K16248
• 研究機関: 和歌山県立医科大学
• 研究代表者: 細井 裕樹 和歌山県立医科大学, 医学部, 講師 (00646036)
• 研究期間 (年度): 2021-04-01 – 2023-03-31
• キーワード: PVT1 / lncRNA / 8q24染色体転座 / microRNA / スーパーエンハンサー

研究実績の概要

悪性リンパ腫の予後は分子標的薬の登場により改善したが、進行期悪性リンパ腫の予後はまだ十分ではない。特に一部の8番染色体長腕24バンド（8q24）染色体転座を有する悪性リンパ腫の予後は不良である。染色体転座点近傍には腫瘍発症に重要な遺伝子が存在する。8q24転座点近傍にはガン遺伝子MYCとその下流にPlasmacytoma variant translocation 1 (PVT1)が存在する。PVT1はlong intergenic non-coding RNA（lncRNA）である。本研究の目的は、①PVT1内のmicroRNA (miR)と②転座により形成されるスーパーエンハンサーによるPVT1への影響に着目して悪性リンパ腫発症におけるPVT1の役割を明らかにすることである。
令和3年度はPVT1 5’発現抑制効果の検討を行った。PVT1 5’発現を抑制するlocked nucleic acidであるGapmeRを複数設計して8q24転座を有するB細胞株にトランスフェクションした。浮遊細胞株へのトランスフェクションであるため、リポフェクションとエレクトロポレーションの両方で条件を検討して行った。PVT1 5’を標的としたGapmeRにより短時間のPVT1 5’発現抑制を得られたが、細胞増殖変化は明らかにならなかった。コロニーフォーメーションアッセイでも細胞増殖変化を検討中である。また、PVT1 5’領域をCRISPRで欠失させるベクターを設計した。レンチウイルスを用いたトランスフェクションを行い、ベクターの妥当性を検討中である。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

令和3年度はGapmeRを用いたPVT1 5’発現抑制を試みた。PVT1 5’発現抑制効果を十分には得られず、発現抑制の条件検討を継続している。また、PVT1 5’領域をCRISPRで欠失させるベクターを設計しスーパーエンハンサーがPVT1へ及ぼす作用の検討準備を行っている。

今後の研究の推進方策

GapmeRを用いたPVT1 5’発現抑制に関して、PVT1 5’のターゲット部位とトランスフェクションの条件を検討しながらPVT1 5’発現抑制による細胞増殖変化を引き続き検討する。GapmeRでは十分にPVT1 5’発現抑制を行えない場合には、PVT1 5’を標的としたshRNAでの発現抑制も検討する。また、PVT1 5’領域をCRISPRで欠失させた際の細胞増殖変化を検討し、PVT1の腫瘍増殖における役割とPVT1がMYC発現に与える影響を検討する。

次年度使用額が生じた理由

次年度への繰り越しは少額のみであり、令和4年度に使用する試薬の購入に使用する。

研究成果

• [雑誌論文] Liquid biopsy of plasma and cerebrospinal fluid are useful for detection of intravascular lymphoma with central nervous system symptoms alone. (2022)
  • 著者名/発表者名: Hosoi H, Tanigawa I, Kosako H, Okamoto A, Iwamoto R, Koh J, Mori M, Hiroi T, Mushino T, Murata S, Murata SI, Tomita A, Sonoki T.
  • 雑誌名: Annals of Hematology 巻: 101 ページ: 709-711
  • DOI: 10.1007/s00277-021-04572-2.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Dose-adjusted high-dose chemotherapy with autologous stem cell transplantation for elderly (>70 years old) lymphoma patients. (2022)
  • 著者名/発表者名: Hosoi H, Murata S, Mushino T, Tamura S, Sonoki T.
  • 雑誌名: Annals of Hematology 巻: 101 ページ: 205-207
  • DOI: 10.1007/s00277-020-04373-z.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Detection of pulse rate elevation by Apple Watch in a patient with bronchiolitis obliterans syndrome after allogeneic stem cell transplantation. (2022)
  • 著者名/発表者名: Mushino T, Nishikawa A, Hiroki T, Matsuyama Y, Hosoi H, Murata S, Tamura S, Sonoki T.
  • 雑誌名: Annals of Hematology 巻: 101 ページ: 897-899
  • DOI: 10.1007/s00277-021-04625-6.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Management of warm autoimmune hemolytic anemia related to band 3-positive colon carcinoma. (2022)
  • 著者名/発表者名: Matsuyama Y, Hosoi H, Horitani R, Kawamoto S, Hashimoto T, Kimura M, Nakai H, Mushino T, Sonoki T.
  • 雑誌名: Annals of Hematology 巻: 101 ページ: 1343-1344
  • DOI: 10.1007/s00277-021-04714-6.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Prolonged Epstein-Barr virus reactivation coincidence with chronic graft-versus-host disease after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation. (2022)
  • 著者名/発表者名: Hosoi H, Matsuyama Y, Murata S, Mushino T, Sonoki T.
  • 雑誌名: Leukemia Lymphoma 巻: 63 ページ: 1009-1012
  • DOI: 10.1080/10428194.2021.2005047.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Severe aplastic anemia after COVID-19 mRNA vaccination: Causality or coincidence? (2022)
  • 著者名/発表者名: Tabata S, Hosoi H, Murata S, Takeda S, Mushino T, Sonoki T.
  • 雑誌名: Journal of Autoimmunity 巻: 126 ページ: 102782
  • DOI: 10.1016/j.jaut.2021.102782.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Tirabrutinib maintenance therapy for a patient with high-dose methotrexate-ineligible primary central nervous system lymphoma. (2022)
  • 著者名/発表者名: Okamura T, Hosoi H, Matsufusa T, Akagi Y, Iwamoto R, Kosako H, Murata S, Mushino T, Murata SI, Sonoki T.
  • 雑誌名: Annals of Hematology 巻: 101 ページ: 1379-1381
  • DOI: 10.1007/s00277-021-04744-0.
  • 査読あり
• [雑誌論文] A cluster of BK polyomavirus-associated hemorrhagic cystitis after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation. (2021)
  • 著者名/発表者名: Hosoi H, Murata S, Suzuki T, Li TC, Hatanaka K, Tanaka-Taya K, Mushino T, Kuriyama K, Tamura S, Hanaoka N, Sonoki T.
  • 雑誌名: Transplant Infectious Disease 巻: 23 ページ: e13736
  • DOI: 10.1111/tid.13736.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Composite Epstein-Barr Virus-associated T-lymphoblastic and Peripheral T-cell Lymphomas: A Clonal Study. (2021)
  • 著者名/発表者名: Hosoi H, Mushino T, Nakashima K, Kuriyama K, Tamura S, Murata S, Imadome KI, Ohshima K, Sonoki T.
  • 雑誌名: Internal Medicine 巻: 60 ページ: 2119-2123
  • DOI: 10.2169/internalmedicine.6572-20.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Role of bone marrow aspiration clots for evaluating cellularity: comparison of clots, biopsies, and smears. (2021)
  • 著者名/発表者名: Tanaka K, Hosoi H, Kodama R, Tabata S, Hiroi T, Kida Y, Mushino T, Murata S, Tamura S, Ikeda T, Sonoki T.
  • 雑誌名: Annals of Hematology 巻: 100 ページ: 2843-2844
  • DOI: 10.1007/s00277-021-04596-8.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Intracranial hemorrhage in a patient with TAFRO syndrome treated with cyclosporine A and rituximab (2021)
  • 著者名/発表者名: Akagi Y, Kato T, Yamashita Y, Hosoi H, Murata S, Yamamoto S, Warigaya K, Nakao T, Murata SI, Sonoki T, Tamura S
  • 雑誌名: Medicina 巻: 57 ページ: 971
  • DOI: 10.3390/medicina57090971.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] 当院におけるテレビ会議システムを用いた遠隔同種移植後長期フォローアップ外来の取り組み. (2021)
  • 著者名/発表者名: 蒸野寿紀、西川彰則、堀善和、小浴秀樹、栩野祐一、吉田菊晃、森本将矢、高木良、上田かやこ、細井裕樹、村田祥吾、田村志宣、園木孝志
  • 雑誌名: 日本造血細胞移植学会誌 巻: 10 ページ: 113-117
  • 査読あり
• [学会発表] 当科における活性型血液凝固第VII因子製剤を投与された後天性血友病A症例の検討 (2021)
  • 著者名/発表者名: 細井裕樹、蒸野寿紀、弘井孝幸、村田祥吾、西川彰則、田村志宣、園木孝志
  • 学会等名: 第43回日本血栓止血学会学術集会
• [学会発表] Reduction of IgG level after R-chemo might be a predictive factor for prognosis in B-cell lymphoma. (2021)
  • 著者名/発表者名: Tabata S, Hosoi H, Tanaka K, Hiroi T, Kida Y, Mushino T, Murata S, Tamura S, Ikeda T, Sonoki T.
  • 学会等名: 第83回日本血液学会学術集会
• [学会発表] Long-term follow-up of DLBCL patients aged over 80 years treated with reduced dose R-THP-COP. (2021)
  • 著者名/発表者名: Hiroi T, Hosoi H, Kuriyama K, Morimoto M, Murata S, Mushino T, Tamura S, Sonoki T.
  • 学会等名: 第83回日本血液学会学術集会
• [学会発表] Role of BM aspiration clots: comparison of clots, biopsies, and smears for evaluating BM cellularity. (2021)
  • 著者名/発表者名: Tanaka K, Hosoi H, Kodama R, Tabata S, Hiroi T, Kida Y, Mushino T, Murata S, Tamura S, Ikeda T, Sonoki T.
  • 学会等名: 第83回日本血液学会学術集会
• [学会発表] Primary myelofibrosis showing Sweet's syndrome, progressive dysplasia, and mutational evolution. (2021)
  • 著者名/発表者名: Kosako H, Hosoi H, Tanaka M, Iwamoto R, Iwahashi Y, Mori Y, Tanigawa I, Sakaki A, Takeda S, Yokoya Y, Tabata S, Yoshida K, Tochino Y, Hiroi T, Yamashita Y, Mushino T, Murata S, Nishikawa A, Tamura S, Jinnin M, Sonoki T.
  • 学会等名: 第83回日本血液学会学術集会