| 研究課題/領域番号 |
21K16603
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| 研究機関 | 東京医科歯科大学 |
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研究代表者 |
福島 雄大 東京医科歯科大学, 生体材料工学研究所, 助教 (40837895)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| キーワード | 脳梗塞 / mRNA医薬 / 神経再生 / アストロサイト / リハビリテーション |
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| 研究実績の概要 |
脳梗塞による神経学的後遺症に対する有効な治療法はリハビリテーションのみであるが、その効率は時間の経過とともに低下する。本研究では、脳梗塞発症後早期に発現している遺伝子を、mRNA医薬により脳梗塞慢性期に強制発現させることで、神経機能再生治療を臨床応用することを目指している。これまでの研究で、齧歯類脳梗塞モデルにおける慢性期リハビリテーション効率低下に、astrocyteが強く関与していることを示唆するデータが得られており、astrocyteの遺伝子発現の経時変化に着目した遺伝子解析を進めている。
一般的に用いられているastrocyteの単離や培養法は、生後数日の齧歯類個体由来の細胞を用いることが多い。しかし、自動分散破砕装置・磁気細胞分離技術を用いることで、成体由来のastrocyteの単離や、本サンプル中のRNA精製が可能となり、脳梗塞を対象疾患とする研究において、より適切なサンプルを用いた解析が見込まれる。そこで本年度は、この自動分散破砕装置・磁気細胞分離技術を用いた、成体齧歯類脳からのastrocyte単離と、発現遺伝子解析法、およびin vitroモデルの確立に着手した。RT-PCR法による特異的遺伝子発現解析、及びflow cytoetry法での特異的抗体標識解析により、成体個体由来のastrocyteが単離されていることを確認し、目的の細胞サンプルを得ることに成功した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
2021・2022年度の研究で、成体齧歯類個体由来astrcoteの単離法の確立と、これを用いた解析、治療遺伝子発現の選定を予定したが、概ね当初の予定通りの進捗が得られている。
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| 今後の研究の推進方策 |
2021年度の結果を踏まえ、脳梗塞急性期、慢性期のastrocyte phenotype解析、さらには治療遺伝子の選定のためのin vitroモデルでの実験を進めることを予定している。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
2021年度、2022年度の研究を、概ね2年度を通して行うことを予定しており、19,346円の残額が生じたが、引き続き、2022年度研究に用いることを予定している。
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