| 研究課題/領域番号 |
21K16738
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| 研究機関 | 千葉大学 |
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研究代表者 |
黒住 顕 千葉大学, 大学院医学研究院, 特任助教 (10710543)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| キーワード | microRNA |
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| 研究実績の概要 |
当初の研究計画に先立って、まずHSPC細胞と比較してCRPC細胞で発現が著明に亢進することのある1つのmicroRNAに着目して、解析を進めた。このmicroRNAは、その前駆体であるpri-microRNAが、pri-microRNA-1とpri-microRNA-2の2つ、異なる染色体上にコードされていることがすでに分かっており、real time PCR法を施行することで、CRPC細胞において発現が亢進するのは、pri-microRNA-2のほうであることが分かった。ちなみに文献的報告によると、このpri-microRNAは、乳癌細胞においても発現が変化することが分かっており、その詳細なメカニズムは不明だが、性ホルモンの発現レベルと深く関係するmicroRNAではないかと推測している。
次に、pri-microRNA-2の詳細な転写開始部位について、5'-RACE法を施行することで、突き止めた。その転写開始地点からは、さまざまな既知遺伝子のsplice variantが転写されていることが分かった。実際に、これらのsplice variantがHSPC細胞株と比較してCRPC細胞株において著明に発現亢進していることをRT-PCR法により確認することができた。
今後は、このsplice variantがCRPC細胞において翻訳されているのか、それともノンコーディングRNAなのか、検証が必要と考える。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
CRPC細胞株を用いたRNAシーケンス解析により発現亢進していたマイクロRNAについて、当初の計画通り、臨床検体でその発現レベルを確認し、機能解析も施行したため。
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| 今後の研究の推進方策 |
研究計画では、マイクロRNAだけでなく、HOXC遺伝子群についても発現パターンや機能解析を行う予定であり、今後は、臨床検体を用いて、その解析を施行していく予定である。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
本年度は研究に必要な物品の購入ができなかったため、次年度に購入を検討している。
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