細胞競合現象に基づく上咽頭癌発癌機構の解析と、新規治療法の開発

2023 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 21K16840
• 研究機関: 金沢大学
• 研究代表者: 小森 岳 金沢大学, 医学系, 協力研究員 (20632524)
• 研究期間 (年度): 2021-04-01 – 2024-03-31
• キーワード: 細胞競合 / EBV / タイムラプス観察

研究実績の概要

昨年度までに、咽頭上皮細胞株NP69（正常細胞モデル）を用いて、GFP-LMP1を発現するベクターをレトロウイルスベクターを用いて導入し、また同様にGFP-LMP1陽性のNP69（前癌細胞モデル）を作製した。正常細胞モデルと、前癌細胞モデルをコラーゲン・ゲルdishで共培養することで、通常状態におけるwinnerとloserの動向を蛍光タイムラプス顕微鏡で観察することを可能とするモデルシステムの構築に費やした。また、緑に発色するNP69-GFPLMP1に加え、赤色に発色するNP69-RFP細胞に加え、EBV陰性上咽頭癌細胞株であるHK1にGFPで標識したリコンビナントEBVを感染させたHK1-EBV-GFPならびに非感染細胞であるHK1-RFOを樹立した。これらの細胞を使用し、共焦点顕微鏡を用いて、Z軸からの観察すなわち、はじき出しによる排除や潜りこみによる増殖を観察した。また、タイムラプス顕微鏡を用いて最適な条件について検討を行なった。タイムラプス観察のモデルシステムの条件設定は様々な条件で行なったが、６ウェルでプレート底面に薄くコラーゲンゲルを薄く塗布したプレートでの観察が最も観察が容易となる条件となった。プレートの観察中の歪みを避けるため、専用の培養チェンバーを使用して定常的に混合ガスおよび湿潤用の精製水を供給できるシステムを用いて連続観察システムを構築した。本年はこの観察システム化に各種薬剤の添加によってどのような変化が見られるか解析を行い、レスベラトロールの添加によって細胞競合現象に変化がみられることを見出した。また細胞競合マーカーであるSparcを上咽頭癌生検組織標本において評価しEBV発現との関連性について解析を行い、臨床的背景因子との関連性を検討した。

研究成果

• [雑誌論文] Peritumoral SPARC expression induced by exosomes from nasopharyngeal carcinoma infected Epstein-Barr virus: A poor prognostic marker (2024)
  • 著者名/発表者名: Dochi H, Kondo S, Komura S, Moriyama-Kita M, Komori T, Nanbo A, Sakaguchi M, Fukuyo M, Hamabe-Horiike T, Tanaka M, Mizokami H, Kano M, Kitagawa Y, Kobayashi E, Hirai N, Ueno T, Nakanishi Y, Endo K, Sugimoto H, Hanayama R, Kaneda A, Yoshizaki T.
  • 雑誌名: International Jorunal of Cancer 巻: 154 ページ: 895-911
  • DOI: 10.1002/ijc.34777
  • 査読あり