| 研究課題/領域番号 |
21K16860
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| 研究機関 | 名古屋市立大学 |
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研究代表者 |
南方 寿哉 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 助教 (10770612)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2025-03-31
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| キーワード | 内耳特異的ノックアウトマウス / カルシウム感知受容体 |
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| 研究実績の概要 |
我々は内耳ラセン靭帯へのカルシウム感知受容体（CaSR）の発現を免疫染色、ウェスタンブロッティング法にて確認した。またカルシウムイメージング法を使用し同部位での発現が機能的な発現であることを確認した。そこでラットを使用し、蝸牛内に正円窓経由にて直接薬剤を投与する方法を開拓し、同法にて蝸牛内に直接CaSR阻害薬であるNPS-2143及び作動薬のR-568を投与し、その際の聴力の変化をABRにてリアルタイムにて測定し投与直ちに聴力が低下することを見出した。
そこでノックアウトマウスを作製しCaSRの内耳での働き、聴力への関与についての検討を行う方針としノックアウトマウスの作製に着手した。しかし、CaSRを単独でノックアウトすると高カルシウム血症にて生後数時間で死亡するため、CASR/PTHダブルノックアウトマウスを作製する方針とした。しかし、ダブルノックアウトマウスも一部を除き大部分は生後数時間で死亡したため内耳特異的にCaSR/PTHをノックアウトさせたマウスの作製を行う方針と、現在他の内耳特異的なノックアウトマウスを参考に作成中である。また同時に一部の生存したCaSR/PTHダブルノックアウトマウスを使用し解析を進めている。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
4: 遅れている
理由
ノックアウトのマウスの作製が当初想定よりかなり難航しているため
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| 今後の研究の推進方策 |
ノックアウトマウスの作製をすすめると同時に薬剤にてCaSRの機能をブロックさせたマウスを使用しての解析を行う予定である。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
ノックアウトマウスの作製に手間取っているためノックアウトマウスにて解析予定の試薬が持ち越しとなっている。次年度はノックアウトマウスの作製及びできなかった場合は別の方法での実験に使用する予定である。
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