| 研究課題/領域番号 |
21K16885
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| 研究機関 | 東京女子医科大学 |
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研究代表者 |
蒋池 かおり 東京女子医科大学, 医学部, 助教 (90792408)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2025-03-31
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| キーワード | ミュラーグリア / 網膜 / 増殖 / MMS / MNU / アルキル化剤 / 視細胞傷害 / 視細胞変性 |
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| 研究実績の概要 |
魚類などの下等脊椎動物のミュラーグリアは網膜傷害時に脱分化して増殖し、神経細胞に再分化して網膜を再生する。哺乳類のミュラーグリアでも同様な性質は報告されているが、神経細胞への再分化はごく僅かで網膜の再生には至らない。哺乳類のミュラーグリアの神経再生能が抑制されている要因は未だわかっておらず、申請者らは、傷害された哺乳類の網膜を再生させることを目的に、このミュラーグリアに注目している。
視細胞変性を誘導することで知られているアルキル化剤、sigma社製N-methyl-N-nitrosourea (MNU)（MNU-S）、Toronto Research Chemicals社製MNU（MNU-T）、Nacalai社製Methyl Methanesulfonate (MMS) をラットへ腹腔内投与し、それぞれの視細胞変性の程度とミュラーグリアの増殖応答について比較検討を行った。その結果、MMSを投与したラットではMNUを投与したラットよりも①錐体視細胞が長く生残すること、②ミュラーグリアの増殖応答が促進されること、③網膜傷害後、ミュラーグリアが分泌する神経保護因子として知られているLifの遺伝子発現が高いこと、④ミュラーグリアおよび傷害を受けた視細胞が分泌し、ミュラーグリアの増殖応答に関与することが報告されているFgf2の遺伝子発現が高いことを明らかにした。以上の結果から、MMSを投与したラットではLifによって錐体視細胞が保護され長く生残すること、桿体視細胞の方がミュラーグリアからの保護効果が弱いこと、生残した錐体視細胞あるいはミュラーグリア自身が分泌したFgf2がミュラーグリアの増殖応答を促進する可能性が示唆された。
また、申請者らはこれらの結果を纏めた論文の本年度中の投稿および受理を目指していたが、2024年1月にScientific Reports誌にて報告した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
昨年度立てた推進方策のうち、「3つの試薬による視細胞の傷害とミュラーグリアの増殖応答について令和5年度中の論文投稿および受理を目指す。」については、目標通り本年度中の報告を果たした。ミュラーグリアの増殖応答のメカニズムを解析する研究として、細胞死へと向かう桿体視細胞とミュラーグリアの増殖応答との関係に注目した報告はあるが、錐体視細胞に注目した報告は殆どない。本研究によって錐体視細胞によるミュラーグリアの増殖応答を制御するメカニズムが存在する可能性を見出したことは重要であり、その重要性を明らかにすることで網膜再生医療に寄与することを目指したい。また、「貪食細胞がミュラーグリアの増殖応答へ及ぼす影響」については、Fluorescence activated cell sorter （FACS）を用いてミクログリアを単離し、遺伝子発現の検討を行うための準備については予定通り進んでいることを勘案して、おおむね順調に進展していると評価できる。
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| 今後の研究の推進方策 |
令和5年度の目標として、「3つの試薬による視細胞の傷害とミュラーグリアの増殖応答について令和5年度中の論文投稿および受理を目指す。」を掲げていたが、上述した通り本年度Scientific Reports誌での報告を果たした。また、「貪食細胞がミュラーグリアの増殖応答へ及ぼす影響」についてFluorescence activated cell sorter （FACS）を用いてミクログリアを単離し遺伝子発現の検討を行うための準備を進めている。
令和6年度では、以下のような推進方策を立てる。「貪食細胞がミュラーグリアの増殖応答へ及ぼす影響」について、傷害のない網膜と傷害後の網膜からミュラーグリアとミクログリアを単離し、どのような遺伝子発現をしているのかreal-time PCR法を用いて比較検討する。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
本年度は論文執筆にあたり多くの時間を要し、840,801円の次年度使用金が発生した。次年度も本研究を遂行するにあたり、分子生物学的解析に必要な酵素、抗体、消耗品および実験用動物を購入する。また、コロナ禍の影響が減少し、現地開催の発表の場も増えてきたため精力的に発表の場へ参加する予定であり、そのための出張費として使用する。
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