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2023 年度 実施状況報告書

歯根膜培養上清とエピゲノム修飾技術を応用した歯髄誘導型人工的歯根膜の作製

研究課題

研究課題/領域番号 21K17025
研究機関北海道医療大学

研究代表者

原田 文也  北海道医療大学, 歯学部, 講師 (30824205)

研究期間 (年度) 2021-04-01 – 2025-03-31
キーワード歯周組織再生 / エピジェネティクス修飾 / 歯根膜線維芽細胞 / 歯髄ー歯根膜線維芽細胞相違遺伝子 / 歯髄誘導型人工歯根膜
研究実績の概要

歯牙への栄養供給を行う歯髄組織に存在する歯髄幹細胞は、再生医療への応用可能性が示唆されているが、臨床応用へは未だ進んでいない。一方、歯根膜の喪失を主体とした歯周炎では、エムドゲインなどの歯周組織再生療法が臨床応用されているが、その適応症は中等度歯周炎までに限定されており、抜歯適応となる重度歯周炎に対しての有効な治療法は未だ無い。歯髄と歯根膜は線維芽細胞を主体とした複数の細胞集合体であり、それぞれ幹細胞も存在するなど共通点もあるが、マラッセ上皮細胞の有無などによる機能遺伝子の違いもある。その違いを改良し、歯髄を歯根膜様組織へ誘導できれば新たな歯周組織再生療法として応用可能になると考える。本研究では、歯髄でOFFになっている歯根膜機能遺伝子の発現誘導を行い、歯髄誘導型人工的歯根膜を作製することを目的とする。今年度は、昨年度行った歯髄培養細胞と歯根膜培養細胞でのRNA発現網羅的解析に加え、歯根膜細胞の培養上清で歯髄細胞を培養し、RNA発現網羅的解析を行う予定であった。しかしながら、同一抜去歯からの歯髄と歯根膜の検体回収および培養に時間を要してしまい、次世代シーケンサーによるRNA発現網羅的解析を行うことができなかった。これまでの結果として、Differentially expressed genes (DEGs)解析において大きな発現変化を示した上位遺伝子に、Keratin 14とKeratin 16が認められた。Keratin 14とKeratin 16は歯根膜には存在するが歯髄には存在しないマラッセ上皮遺残で発現する遺伝子であることから、歯髄を歯根膜再生に応用する際の重要な機能遺伝子であることが示唆された。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

4: 遅れている

理由

今年度は、同一抜去歯からの歯髄と歯根膜の検体回収および培養に時間を要してしまい、当初予定していた、歯根膜細胞の培養上清による歯髄細胞の培養実験の解析を行うことができなかった。

今後の研究の推進方策

今後は、今年度行う予定であった歯根膜細胞の培養上清で歯髄細胞を培養し、RNA発現網羅的解析を行い、歯髄を歯根膜様細胞へ誘導するための因子について解析を行う予定である。

次年度使用額が生じた理由

同一抜去歯からの歯髄と歯根膜の検体回収および培養に時間を要してしまい、次世代シーケンサーによるRNA発現網羅的解析を行うことができなかった。今後は、昨年度行う予定であった歯根膜細胞の培養上清で歯髄細胞を培養し、RNA発現網羅的解析を行い、歯髄を歯根膜様細胞へ誘導するための因子について解析を行う予定である。

  • 研究成果

    (1件)

すべて 2023

すべて 学会発表 (1件)

  • [学会発表] RNA-seqによる歯髄細胞と歯根膜細胞での遺伝子発現解析2023

    • 著者名/発表者名
      吉田光希,原田文也,安彦善裕
    • 学会等名
      第43回日本歯科薬物療法学会・第36回日本口腔診断学会・第33回日本口腔内科学会・第32回日本口腔感染症学会

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公開日: 2024-12-25  

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