| 研究課題/領域番号 |
21K18224
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| 研究機関 | 京都大学 |
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研究代表者 |
本田 与一 京都大学, 農学研究科, 教授 (70252517)
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| 研究分担者 |
河内 護之 京都大学, 農学研究科, 特定准教授 (70771294)
中沢 威人 京都大学, 農学研究科, 助教 (80608141)
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| 研究期間 (年度) |
2021-07-09 – 2026-03-31
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| キーワード | 白色腐朽菌 / タンパク質分泌系 |
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| 研究実績の概要 |
高額なバイオ医薬品を、進化的にユニークな真核生物である事かがわかってきた担子菌(きのこの仲間)を利用して効率的に生産するためのシステム作りを目指す研究です。具体的には、ヒト型の糖鎖修飾酵素遺伝子を担子菌に人工的に導入し、培養後に発現誘導をかけることで、休止菌体を用いてヒト型糖鎖修飾された組換えタンパク質の生産を行います。研究が成功すれば、動物ウィルスの混入のないヒト型タンパク質を製造する技術が確立され、ガンやウィルスに対する抗体療法などを安心安全かつ安価に提供可能になることが期待されます。 高マンノース型以降の修飾系をもたないという真核生物の共通祖先に通じると考えられるユニークな糖鎖修飾系を持つ事がわかった担子菌を用いて、ヒト型の糖鎖修飾系を合成生物学的な手法により導入して、休止菌体によるヒト型糖タンパク質の生産システム構築を目指します。このようにして生産されたヒト型糖タンパク質は、安価で安全なバイオ医薬品として活用されることが期待される。子嚢菌類とは進化的に異なるグループに属する担子菌を新たな産業用微生物として利用していく分野を開拓することが目標です。咋年度は、小胞体、ゴルジ体相当物、分泌小胞などのタンパク質分泌系を構成する様々な細胞内小器官に局在すると予想される複数のタンパク質と蛍光タンパク質の融合タンパク質を組換えにより作成し、ヒラタケに形質転換して、それぞれの分泌系細胞内小器官の局在について調べました。今年度は、ゴルジ体のうち初期および後期ゴルジ体に相当する器官に局在すると考えられるタンパク質を用いてさらに解析を進めました。一方で、基盤技術として必要なヒラタケにおけるゲノム編集技術の改善を進めました。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
1: 当初の計画以上に進展している
理由
担子菌類におけるタンパク質分泌越系の可視化が、世界に先駆けて進んでいるため。またヒラタケにおいて、より効果的で安全性の高いゲノム編集を可能にする基盤的な技術の改良も進んでいる。
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| 今後の研究の推進方策 |
ゴルジ体の内部の分画が可能かどうかについてさらに解析を進めるとともに、ヒト型の糖鎖修飾機能を持つ酵素遺伝子を、形質転換により導入し、分泌タンパク質の修飾糖鎖構造に変化があるか解析を行う。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
ゴルジ体内の顕微鏡学的な分画が当初予定より進まなかったため、サブ課題の一つであるヒト型糖鎖の構築部分の開始が当初計画より遅くなっているため、残額が生じた。次年度以降この部分を加速させることで、使用計画に追いつく予定である。
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