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2021 年度 実施状況報告書

生体高分子の動的挙動解明と機能材料への展開に資する高感度時間分解CD測定装置開発

研究課題

研究課題/領域番号 21K18992
研究機関東北大学

研究代表者

和田 健彦  東北大学, 多元物質科学研究所, 教授 (20220957)

研究期間 (年度) 2021-07-09 – 2023-03-31
キーワード円二色性スペクトル測定 / 高時間分解 / 高感度 / 楕円偏光検出 / 方位角制御
研究実績の概要

現在、生体分子を対象とした機能性物質設計・開発には、結合前後の構造同定や形成過程の速度論的・熱力学的解析検討が多用されるが、より精緻な設計には複合体形成過程の動的挙動直接的観察・解析が重要になると考えられている。円二色性(CD)スペクトル測定は、構造変化の動的挙動を高感度で検出可能で重用されてきたが、現行CDの時間分解能は原理的にm秒程度で、μ秒程度の早い複合体形成検出には本質的な適用限界が指摘されている。このため高感度と高時間分解能を両立可能な新規CD測定原理と測定装置開発が切望されてきた。本研究では研究協力者の荒木保幸准教授の発案した楕円偏光を検出光として用いる新規検出法を活用した高感度・高時間分解CD測定装置開発に取組んでいる。
令和3年度は、再現性と取扱い性に優れた新たな楕円偏光制御法ならびに光路系構築による高感度検出装置開発を目指した。我々は楕円偏光検出系の位相板に方位角を導入した新たな理論式を導出し、実測される左右楕円偏光強度IR、ILから算出されるシグナル強度Sは方位角を小さくすることで増大すること、増大したシグナル強度SによりS/Nの向上、その結果高感度検出が期待できることを見出した。実際に位相板の方位角を、従来用いられてきた90度と-90度から、45~2度&-45~2度と大きく減少させシグナル強度Sの変化を詳細に検討したところ、方位角減少に伴いS値が増大し、その結果S/Nの向上・高感度検出が実現可能であることを実証した。この方位角変化に基づく高感度観測法は、従来法に比較して高い再現性を有し、高感度・高時間分解CD測定装置開発につながることが期待される。次に構築した楕円偏光検出CD測定システムを用い、実サンプルによる概念実証試験に取組んだ。キラルRu錯体を試料とし測定条件最適化ならびに市販CD測定装置との詳細な比較検討を行い、本システムの有効性実証に成功した。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

1: 当初の計画以上に進展している

理由

本研究では研究協力者荒木保幸准教授の発案した新規楕円偏光制御法に基づく高感度・高時間分解CD測定装置開発に取り組み、Kligerらが提案・報告している楕円偏光検出CD測定系の理論的再検討に取り組み、位相板の方位角を導入した新たな理論式を導出し、高感度検出の可能性を見出し、新たな高感度測定法構築に向けた仮説を提案した。しかし、技術的問題も含め、本仮説の実証実験には困難が伴うことを予想していた。実際の測定系構築、特に再現性良い方位角制御法の構築や光路設定は容易ではなく、かなりの時間と労力を要した。しかし、新しい方位角制御プログラムを導入することにより、再現性良く、大きなシグナル強度Sの測定可能なシステム構築に成功し、当初予想・計画以上に進展したと評価される。

今後の研究の推進方策

本年度は、高感度高時間分解能を有する円二色性(CD)測定装置開発を目指し、主に理論的再検討に取り組み、位相板の方位角を導入した新たな理論式を導出し、高感度検出の可能性を見出し、新たな高感度測定法構築に向けた仮説を提案を行った。実際の測定系構築、特に再現性良い方位角制御法の構築は容易ではなく、かなりの時間と労力を要した。しかし、新しい方位角制御プログラムを導入することにより、再現性良く、大きなシグナル強度Sの測定可能なシステム構築に成功したため、主に理論的検討ならびに基本装置レイアウトなどの最適化に専念したため、当初予定に比較して研究経費、旅費等の執行額は大幅な減額となった。
来年度は構築に成功したシステムを用い、積極的な実測定に取り組むため、測定用サンプル購入や光学系部品など当初本年度購入を予定していた消耗品も含め購入するため、次年度使用額も含めた配分経費の全額執行を予定している。

次年度使用額が生じた理由

本年度は、高感度高時間分解能を有する円二色性(CD)測定装置開発を目指し、主に理論的再検討に取り組み、位相板の方位角を導入した新たな理論式を導出し、高感度検出の可能性を見出し、新たな高感度測定法構築に向けた仮説を提案を行った。実際の測定系構築、特に再現性良い方位角制御法の構築は容易ではなく、かなりの時間と労力を要した。しかし、新しい方位角制御プログラムを導入することにより、再現性良く、大きなシグナル強度Sの測定可能なシステム構築に成功したため、主に理論的検討ならびに基本装置レイアウトなどの最適化に専念したため、当初予定に比較して研究経費、旅費等の執行額は大幅な減額となった。
来年度は構築に成功したシステムを用い、積極的な実測定に取り組むため、測定用サンプル購入や光学系部品など当初本年度購入を予定していた消耗品も含め購入するため、次年度使用額も含めた配分経費の全額執行を予定している。

  • 研究成果

    (11件)

すべて 2022 2021 その他

すべて 国際共同研究 (1件) 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 3件、 オープンアクセス 2件) 学会発表 (5件) (うち国際学会 5件、 招待講演 3件) 図書 (2件)

  • [国際共同研究] University of Bordeaux(フランス)

    • 国名
      フランス
    • 外国機関名
      University of Bordeaux
  • [雑誌論文] Amphiphilic Perforated Honeycomb Films for Gravimetric Liquid Separation2022

    • 著者名/発表者名
      Chen Bihai、Wada Takehiko、Yabu Hiroshi
    • 雑誌名

      Advanced Materials Interfaces

      巻: 9 ページ: 2101954~2101954

    • DOI

      10.1002/admi.202101954

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Selective Photo-Crosslinking Detection of Methylated Cytosine in DNA Duplex Aided by a Cationic Comb-Type Copolymer2022

    • 著者名/発表者名
      Kojima Atsuhiro、Nakao Juki、Shimada Naohiko、Yoshida Naoki、Abe Yota、Mikame Yu、Yamamoto Tsuyoshi、Wada Takehiko、Maruyama Atsushi、Yamayoshi Asako
    • 雑誌名

      ACS Biomaterials Science & Engineering

      巻: 8 ページ: 1799~1805

    • DOI

      10.1021/acsbiomaterials.2c00048

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Random laser oscillation from an organic fluorescent dye loaded inside a porous zirconia medium2021

    • 著者名/発表者名
      Sakurayama Yukari、Onodera Tsunenobu、Araki Yasuyuki、Wada Takehiko、Oikawa Hidetoshi
    • 雑誌名

      RSC Advances

      巻: 11 ページ: 32030~32037

    • DOI

      10.1039/d1ra05791j

    • 査読あり
  • [学会発表] Novel Design Strategy of DNA-Artificial Nucleic Acid Chimera Toward Enhancement of Target RNA Cleavage Activities:Application for COVID-19 Therapeutics2021

    • 著者名/発表者名
      Masahito Inagaki,Nozomu Ishiwata,Ryota Azuma,Masaki NIshijima,Hironori Hayashi,Yasuyuki Araki,Eiichi Kodama,Takehiko Wada
    • 学会等名
      ISNAC2021
    • 国際学会
  • [学会発表] Photochirogenesis of 2-Anthracene Carboxylate and 2,6-Anthracene Dicarboxylate mediated by Serum Albumin as Chiral Reaction Nanoreactor2021

    • 著者名/発表者名
      Masaki Nishijima, Nagisa Kanazawa, Misaki Kawai, Sota Toyooka, Yuta Fujishiro, Tadashi Mori, Yasuyuki Araki, Yoshihisa Inoue, ○Takehiko WADA
    • 学会等名
      MRM2021(Materials Research Meeting)
    • 国際学会 / 招待講演
  • [学会発表] DNA-artificial nucleic acids chimeric engineering strategy for enhancement of RNA cleavage function utilizing RNaseH2021

    • 著者名/発表者名
      ○Takehiko WADA,
    • 学会等名
      PACIFICHEM2021
    • 国際学会 / 招待講演
  • [学会発表] Novel design strategy of XNA for enhancement of target RNA cleavage activities with RNaseH and therapeutic effects2021

    • 著者名/発表者名
      ○Takehiko WADA, Presenter; Masahito Inagaki; Akira Yano; Tsuyoshi Yamamoto; Seiya ISHIZAWA; Satoru Ishibashi; Masaki NISHIJIMA; Yasuyuki ARAKI; Satoko Suzuki; Asako Yamayoshi; Takanori Yokota
    • 学会等名
      PACIFICHEM2021
    • 国際学会 / 招待講演
  • [学会発表] Supramolecular enantio- and regioselective photocyclodimerization of 2-anthracenecarboxylate mediated by hybrid nanofibers and antibodies in water2021

    • 著者名/発表者名
      Takehiko WADA, Presenter; Wijak YOSPANYA; Masaki NISHIJIMA; Yasuyuki ARAKI; Reiko ODA
    • 学会等名
      PACIFICHEM2021
    • 国際学会
  • [図書] 刺激応答性高分子の開発動向2021

    • 著者名/発表者名
      荏原充宏
    • 総ページ数
      315
    • 出版者
      シーエムシー出版
    • ISBN
      978-4-7813-1611-6
  • [図書] 進化を続ける核酸化学2021

    • 著者名/発表者名
      日本化学会
    • 総ページ数
      228
    • 出版者
      化学同人
    • ISBN
      9784759814019

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公開日: 2022-12-28  

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