非アルコール性脂肪性肝疾患の治療に資するホスホリパーゼCの解明

2023 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 21K19327
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 河野 望 東京大学, 大学院薬学系研究科(薬学部), 准教授 (50451852)
• 研究期間 (年度): 2021-07-09 – 2024-03-31
• キーワード: ホスホリパーゼC / ホスファチジルイノシトール / 非アルコール性脂肪性肝疾患

研究実績の概要

LPIAT1を欠損したHuh-7細胞は、LPIAT1欠損マウス肝臓と同様にアラキドン酸含有PI の減少とオレイン酸含有PI の増加、中性脂質の蓄積がみられる。この細胞に[14C]グリセロールを添加し、[14C]ラベルされたPI の分解を経時的に調べると、LPIAT1 KO 細胞では野生型に比べてPI の分解が顕著に亢進する。このPI分解の亢進において、分解されるPIに分子種特異性があるか調べるために、d8グリセロールラベルによる標識PIのLC-MSでの検出系を確立した。この分析系を用いて、PIの分解を分子種レベルで調べた結果、アラキドン酸を含むPI分子種は半減期が長いのに対し、アラキドン酸を含まないPI分子種は半減期が短かった。このことから、PIの分解には分子種特異性があることがわかった。次に[14C]グリセロールを用いた細胞レベルでのPI 分解アッセイを利用して、RNAi スクリーニングをおこなった。候補分子として、Huh-7で発現が確認されたPLCファミリー、PI-PLC活性が報告されているPLCXDファミリーおよびSMSr、およびPIサイクルに関わるNir2, Nir3を対象とした。その結果、どの遺伝子の発現抑制によってもLPIAT1 KO細胞での[14C]PIの分解が抑制されなかった。以上から、LPIAT1 KO細胞でPIの分解を担う分子は既知のPI-PLCではないことが示唆された。そこで次に、各種阻害剤を添加し、PI分解を抑制する化合物をスクリーニングした。その結果、PLCの一般的な阻害剤であるU73122やリソソームの酸性化を抑制するクロロキンではLPIAT1 KO 細胞におけるPI分解の亢進を抑制できなかった。一方で、脂質のホスファターゼを抑制する阻害剤の1つがLPIAT1 KO 細胞におけるPI分解の亢進を抑制することを見出した。

研究成果

• [雑誌論文] Cell density-dependent membrane distribution of ganglioside GM3 in melanoma cells (2023)
  • 著者名/発表者名: Murate M, Yokoyama N, Tomishige N, Richert L, Humbert N, Pollet B, Makino A, Kono N, Mauri L, Aoki J, Sako Y, Sonnino S, Komura N, Ando H, Kaneko MK, Kato Y, Inamori KI, Inokuchi JI, Mely Y, Iwabuchi K, Kobayashi T
  • 雑誌名: Cellular and Molecular Life Sciences 巻: 80 ページ: 167
  • DOI: 10.1007/s00018-023-04813-9
  • 査読あり
• [雑誌論文] The plasma membrane of focal adhesions has a high content of cholesterol and phosphatidylcholine with saturated acyl chains (2023)
  • 著者名/発表者名: Tachibana Hiroshi、Minoura Kodai、Omachi Tomohiro、Nagao Kohjiro、Ichikawa Takafumi、Kimura Yasuhisa、Kono Nozomu、Shimanaka Yuta、Arai Hiroyuki、Ueda Kazumitsu、Kioka Noriyuki
  • 雑誌名: Journal of Cell Science 巻: 136 ページ: jcs260763
  • DOI: 10.1242/jcs.260763
  • 査読あり
• [雑誌論文] Disease-related PSS1 mutant impedes the formation and function of osteoclasts (2023)
  • 著者名/発表者名: Sugahara Sari、Ishino Yuki、Sawada Koki、Iwata Tsumugi、Shimanaka Yuta、Aoki Junken、Arai Hiroyuki、Kono Nozomu
  • 雑誌名: Journal of Lipid Research 巻: 64 ページ: 100443～100443
  • DOI: 10.1016/j.jlr.2023.100443
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] PPP1R12A is a recycling endosomal phosphatase that facilitates YAP activation (2023)
  • 著者名/発表者名: Inoue Chiaki、Mukai Kojiro、Matsudaira Tatsuyuki、Nakayama Jun、Kono Nozomu、Aoki Junken、Arai Hiroyuki、Uchida Yasunori、Taguchi Tomohiko
  • 雑誌名: Scientific Reports 巻: 13 ページ: 19740
  • DOI: 10.1038/s41598-023-47138-0
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Phosphatidylserine synthesis controls oncogenic B cell receptor signaling in B cell lymphoma (2023)
  • 著者名/発表者名: Omi Jumpei、Kato Taiga、Yoshihama Yohei、Sawada Koki、Kono Nozomu、Aoki Junken
  • 雑誌名: Journal of Cell Biology 巻: 223 ページ: e202212074
  • DOI: 10.1083/jcb.202212074
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] リン脂質sn-1位脂肪酸導入酵素としてのLPLAT10欠損マウスの機能解析 (2024)
  • 著者名/発表者名: 片岡陸汰、川名裕己、佐藤悠喜飛、可野邦行、河野望、青木淳賢
  • 学会等名: 日本薬学会第144年会
• [学会発表] イノシトール欠乏によるIre1活性化に関わる脂質分子の探索 (2023)
  • 著者名/発表者名: 岩田 紬、山岸 洸太、張 シュウウェン、八代田 英樹、村田 茂穂、新井 洋由、河野 望、青木 淳賢
  • 学会等名: 第65回日本脂質生化学会
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] リサイクリングエンドソーム局在性ホスファターゼPPP1R12AによるYAPの活性化 (2023)
  • 著者名/発表者名: 井上 智景、向井 康治朗、松平 竜之、中山 淳、河野 望、青木 淳賢、新井 洋由、内田 安則、田口 友彦
  • 学会等名: 第65回日本脂質生化学会
• [学会発表] De novo phospholipid synthesis driven by autophagy-related genes is required for saturated fatty acid-induced IRE1α activation. (2023)
  • 著者名/発表者名: Kono N, Ni S, Kasai S, Akagi S, Kanda M, Arai H, _Aoki J
  • 学会等名: Gordon Research Conference, Mol Biol of Lipids
• [学会発表] The role of unusual cardiolipin species in spermatogenesis._ (2023)
  • 著者名/発表者名: Mochizuki D, Akagi S, Shimanaka Y, Aiba A, Sato T, Ogawa T, Arai H, Aoki J, Kono N
  • 学会等名: Gordon Research Conference, Mol Biol of Lipids
• [学会発表] Visualization of biosynthetic activities of phospholipids on tissue sections using mass spectrometry imaging. (2023)
  • 著者名/発表者名: Taiga Iwama, Kuniyuki Kano, Kawana Hiroki, Katsuyuki Nagata, Tomomi Hashidate-Yoshida, Hideo Shindou,, Nozomu Kono, Junken Aoki_
  • 学会等名: Gordon Research Conference, Mol Biol of Lipids
• [学会発表] 飽和脂肪酸による小胞体ストレス応答活性化におけるオートファジー関連分子の役割 (2023)
  • 著者名/発表者名: 河野 望、倪 申_、葛西 俊輔、赤木 聡介、新井 洋由、青木 淳賢
  • 学会等名: フォーラム2023 衛生薬学・環境トキシコロジー
• [学会発表] 膜脂質異常によるIre1活性化におけるVps34の機能解明 (2023)
  • 著者名/発表者名: 岩田 紬、山岸 洸太、張シュウウェン、八代田 英樹、村田 茂穂、新井 洋由、河野 望、青木 淳賢
  • 学会等名: 第13回リピッド合同カンファレンス
• [学会発表] リン脂質sn-1位脂肪酸導入酵素としてのLPLAT10/LPEAT2の機能解析 (2023)
  • 著者名/発表者名: 片岡陸汰、川名裕己、佐藤悠喜飛、可野邦行、河野望、青木淳賢
  • 学会等名: 第22回次世代を担う若手のためのファーマ・バイオフォーラム
• [学会発表] MS イメージングを用いたリン脂質生合成活性の可視化 (2023)
  • 著者名/発表者名: 岩間大河、可野邦行、川名裕己、河野望、長田克之、橋立智美、進藤英雄,、青木淳賢
  • 学会等名: 第13回リピッド合同カンファレンス
• [学会発表] 飽和脂肪酸による小胞体ストレス応答活性化におけるオートファジー関連分子の役割 (2023)
  • 著者名/発表者名: 河野 望
  • 学会等名: 第96回日本生化学会大会
• [学会発表] 飽和脂肪酸による小胞体ストレス応答活性化におけるオートファジー関連分子の役割 (2023)
  • 著者名/発表者名: 河野 望、倪 申_、葛西 俊輔、赤木 聡介、新井 洋由、青木 淳賢
  • 学会等名: 第44回 生体膜と薬物の相互作用シンポジウム
• [学会発表] 初期発生における細胞分化制御性リン脂質分子種の探索 (2023)
  • 著者名/発表者名: 岩間大河、可野邦行、鈴木颯、水野聖哉、村田知弥、杉山文博、河野望、青木淳賢
  • 学会等名: 第96回日本生化学会大会
• [学会発表] アラキドン酸含有ホスファチジルイノシトールは胎児期における神経幹細胞の機能に重要である (2023)
  • 著者名/発表者名: 石野 雄己、岸 雄介、桑山 尚大、川口 大地、新井 洋由、後藤 由季子、河野 望、青木 淳賢
  • 学会等名: 第44回 生体膜と薬物の相互作用シンポジウム
• [学会発表] CDS1欠損マウス精巣・精子の微細形態解析 (2023)
  • 著者名/発表者名: 田上流向、望月大、赤木 聡介、饗場 篤、新井 洋由、河野 望、青木淳賢
  • 学会等名: 第96回日本生化学会大会
• [学会発表] イノシトール欠乏時のIre1活性化に関わる脂質代謝酵素の探索 (2023)
  • 著者名/発表者名: 岩田 紬、山岸 洸太、張 シュウウェン、八代田 英樹、村田 茂穂、新井 洋由、河野 望、青木 淳賢
  • 学会等名: 第96回日本生化学会大会