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神経変性疾患を治療するためには、失われた神経細胞を補充するのみならず、補充された神経細胞が既存の神経回路と機能的な結合をする必要がある。神経細胞 の補充には、iPS細胞から分化させた神経細胞の移植が主に行われてきたが、この方法では神経回路の再構築は困難である。最近アストロサイトのPtbp1遺伝子を ノックダウンすると、アストロサイトがその部位の神経細胞と同じ特徴を持った細胞に分化転換し、既存の神経回路に組み込まれることが、網膜と黒質で示され た。しかし、網膜・黒質における分化転換の効率は十分ではなく、網膜・黒質以外の脳部位のアストロサイトの分化転換能は不明である。本研究では、脳の全て の部位のアストロサイトからPtbp1遺伝子を欠損させ、各部位におけるアストロサイトの分化転換能を解析できるin vivoの系を開発する。その系を用いて、アス トロサイトから神経細胞への分化転換を阻害する遺伝子を同定する。floxd-Ptbp1マウス(Ptbp1遺伝子のエクソン1の両側にloxP配 列をノックインしたマウス)を作成し、GLASTの遺伝子座にCreERT2をノックインしたマウス およびROSA-LSL-tdTomatoマウスと交配した。このマウスが成熟後、タモキシフェンを投与し、神経系の全てのアストロサイト・サテライト 細胞からPtbp1を欠損させたマウスを作成し、小脳のバーグマングリアからプルキンエ細胞への分化転換を、PCのマーカーであるCalbindin抗体を用いて解析し た。Calbindin陽性・tdTomayo陽性細胞が観察されたが、数が少なく、それ以降の解析ができなかった。分化転換の効率を上げるため、脊髄小脳変性症6型モデルマウスを用い小脳バーグマングリアからptbp1を欠損させたマウスを 作成したが、分化転換したプルキンエ細胞は観察されなかった。
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