| 研究実績の概要 |
ウイルス感染における病態の詳細な進行のメカニズムの解析には、同一個体の病態変化を非侵襲的にイメージングできるPETやSPECTが有用であると期待される。 これまでに我々は、18F-FDGや68Ga-citrateを用いたSFTSV感染マウスのPETイメージングを行っており、炎症部位の経時変化を画像化できることを見出された (Hayasaka, Oncotaget, 2016., Fuchigami, ACS Omega, 2017)。本研究では、更なるウイルス選択的な分子プローブへの展開を目指し、ウイルス由来タンパク質に特異的な抗体型分子プローブの開発を試みた。
そこで、罹患すれば致死率が10%を超え、日本でも大きな問題となっているSFTSVを標的とした分子プローブ開発を行った。熱帯医学研究所にて構築されたSFTSV感染細胞由来のN, Gn, Gcタンパク質の3つの異なったタンパク質を標的とした抗SFTSV IgG抗体を用い，SFTSV感染あるいは非感染のVero細胞に対する抗体免疫染色を行った。Nタンパク質標的IgG (N-mAb) がSFTSV非感染細胞に比べて感染細胞への顕著な集積を示したが，Gnタンパク質標的IgGでは集積が低く，Gcタンパク質標的IgG ではほぼ集積を示さなかった。
続いて、N-mAbのリシン残基にSCN-Bn-DTPAを導入し、ゲル濾過にて精製し、MALDI-TOF-MSにて分子量の変化を追跡したところ、平均2分子のDTPA導入が確認された。さらに111In Cl3を用いた111In標識合成を行い、ITLCやSDS-PAGEにて合成と精製に成功していることを確認した。また、正常マウスにて生体内分布評価を行ったところ、既存のIgGと極めて類似した動態を示したことから、合成した111In標識体が抗体型分子プローブとして機能しうることが見出された。
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