| 研究実績の概要 |
真核細胞において、セラミドはその代謝過程で小胞体からゴルジ体へ運ばれる。セラミドのオルガネラ間輸送には、小胞輸送に加えて非小胞輸送が存在する。これまでの解析から私たちは、真核細胞で保存されたTricalbinタンパク質ファミリー (Tcb1, 2, 3) が、セラミドの非小胞輸送に必要であることを発見した。しかしながら、Tricalbinが直接結合するターゲットについて、実験的エビデンスは示されていない。本研究は、Tricalbinを介したセラミド非小胞輸送メカニズムとその生理的意義の解明を目指す。この目的を達成するために、前年度ではTcb3の結合ターゲット脂質についての解析を行った。続いて本年度は、当初の計画通り、非小胞輸送における脂肪滴の関与についての解析を行った。研究実績の概要は、以下の２点である。(1) Tcb3が小胞体と脂肪滴間やゴルジ体と脂肪滴間の膜接触領域に局在している可能性について、蛍光顕微鏡観察による検証を行った。その結果、小胞体に局在するTcb3と、ゴルジ体、脂肪滴の３つのオルガネラが近接して存在している様子が確認された。(2) 脂肪滴の機能あるいは形成がセラミド非小胞輸送に必要であるかを調べるため、脂質代謝ラベリングにより解析を行った。その結果、小胞輸送経路を阻害した条件において、脂肪滴へ貯蔵される中性脂質の合成に必要なアシル化酵素遺伝子の破壊は、小胞体における複合スフィンゴ脂質合成量を低下させることが示された。本研究から得られた成果は、膜接触領域を介したセラミド輸送研究において新規の知見をもたらすものである。
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