| 研究実績の概要 |
本研究では、主に以下5点を検証した。
・末梢神経障害除圧モデルの確立：従来の末梢神経の疼痛に関する動物実験では、鑷子での圧挫や糸による神経障害モデルが採用されてきた。神経保護に働く薬剤は、神経障害と同時投与されることが多く、神経障害による強い炎症と薬剤の神経保護効果が同時に起き、神経の修復過程が評価困難であった。そのため、新しいモデルとして、ナイロン糸での神経絞扼モデルを作成後、von Frey testによる疼痛閾値を指標に、神経周囲を剥離、糸を除去する日数の検討を行った。結果、術後3日が適当であった。
・上記検討とともに、本研究のpositive controlとして、他血小板血漿(PRP)の神経保護効果を検証した。活性化により、ゲル状化したPRP gelを神経絞扼モデルに投与して評価した。投与後7,14日目に神経内での炎症マーカー発現の推移をqPCRにて測定し、コントロール群に比べ、神経内でのTNFa、IL-6 mRNAの発現が有意に抑制された。
・本研究の治療材料である、不死化巨核球株の分化誘導により得られたiPS細胞由来巨核球・血小板(iPM) の凍結乾燥製剤含有の主要なサイトカイン量を測定し、健康な成人男性の4倍濃縮PRPと同等であることを確認した。
・末梢神経障害除圧モデルを用いて、除圧直後にiPM製剤＋担体を、絞扼した末梢神経に局所投与を行う治療群を作製した。結果、神経障害性疼痛は治療群でコントロール群（生食＋担体）に比べ、有意に回復が早かった。
・iPM製剤の神経障害性疼痛効果の抑制機序の検証：in vitroにてヒトSchwann細胞の増殖実験と遊走試験を行った。増殖medium(GM)群とiPM投与群(2.5%, 5%, 10%)で検討し、iPM群で増殖・遊走促進効果を認めた。iPM製剤の神経障害性疼痛抑制効果はこれらSchwann細胞に対する効果を介している可能性が示唆された。
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