|
本研究では卵巣癌に特異的に発現する環状RNAの同定とその機能の解析を行った。具体的には卵巣癌の中でも抗がん剤に対する抵抗性が高く、予後不良である卵巣明細胞癌（OCCC）に焦点を当てた検討を行った。
OCCC症例2検体よりがん組織と正常組織をそれぞれ採取し、RNAを抽出した。そのRNAを用いて、環状RNAマイクロアレイを行い、OCCC特異的に発現が上昇する環状RNAをいくつか同定した。その中より、Validationの結果、circSOD2に着目した。circSOD2がOCCCの細胞株で高発現であることをRT-qPCRで確認した。また他のOCCC組織、良性症例においてもRT-qPCRを行い、circSOD2は正常卵巣や良性子宮内膜症に比べてOCCCで高発現していることを確認した。更にKaplan-Meier法でcircSOD2の発現量と患者の予後を分析すると、高発現群で全生存期間が短かく、circSOD2がOCCCの予後不良に関与する可能性が示唆された。
さらにcircSOD2の機能解析を行った。細胞株（ES2、OVISE）においてsiRNAによるノックダウンを行うと、OCCCの細胞増殖能は変化しなかったが、浸潤能が有意に低下した。環状RNAがタンパク質の発現を変化させる機序としてマイクロRNAを捕捉する機能に注目した。データベース上でcircSOD2との結合が予想されるマイクロRNAを絞り込み（miR-224-5p）、プルダウンアッセイで結合を確認、OCCC細胞に過剰発現させると浸潤は有意に低下した。以上より、circSOD2はmiR-224-5pの機能をスポンジすることにより制御するタンパク質の発現を上昇させ、OCCCの浸潤を促進することが示唆された。
以上、OCCCに特異的に高発現するcircSOD2の癌進展における意義を解明した。
|
