2022 年度研究成果報告書

新規前処理法を用いた尿中薬毒物LC-MS/MS分析法開発

研究課題

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研究課題/領域番号	21K21152
研究種目	研究活動スタート支援
配分区分	基金
審査区分	0908:社会医学、看護学およびその関連分野
研究機関	愛知医科大学
研究代表者	松尾友仁愛知医科大学, 医学部, 助教 (00908824)
研究期間 (年度)	2021-08-30 – 2023-03-31
キーワード	グルクロン酸抱合体 / 加水分解 / LC-MS/MS / 尿中薬毒物 / β-glucuronidase / ISOLUTE HYDRO DME+ / B-One / IMCSzyme RT
研究成果の概要	遺伝子組換えβ-グルクロニダーゼを用いることで、5種類の薬毒物(11-nor-9-carboxy-tetrahydrocannabinol (THC-COOH), oxazepam, lorazepam, temazepam, amitriptyline)のグルクロン酸抱合体を室温3分の短時間で加水分解することができた。加えて、尿中夾雑成分除去カラム（ISOLUTE HYDRO DME+，Biotage）上で加水分解することができるため、前処理過程も短縮することができた。この前処理法を用いたLC-MS/MS分析法は、バリデーションでの妥当性も良好であり、法医解剖試料にも適用することができた。
自由記述の分野	法医学
研究成果の学術的意義や社会的意義	摂取された薬毒物は内因性物質との抱合体として尿中に排泄され、遊離体や未変化体が微量にしか存在しないため、目的の薬毒物が検出できない場合がある。そのため、抱合体を加水分解し、目的の薬毒物の遊離体や未変化体を分析する必要がある。本研究で開発した前処理法では、前処理カラム上で直接、加水分解が可能であり、反応も室温3分で終わるため、従来の方法に比べてより簡便かつ効率的に尿中薬毒物の分析が可能である。従って、法医解剖試料での迅速で正確な尿中薬毒物の検出と定量の精度向上を目指すことができる点で意義深く、今後、法医実務においても非常に有用となることが期待される。