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2012 年度 実績報告書

アモルファス氷層技術と相関顕微鏡法の改良による生体材料の分子分解能観察

研究課題

研究課題/領域番号 22310079
研究機関大阪大学

研究代表者

岩崎 憲治  大阪大学, たんぱく質研究所, 准教授 (20342751)

研究期間 (年度) 2010-04-01 – 2013-03-31
キーワード電子顕微鏡 / 相関顕微鏡 / CEMOVIS / 電子線トモグラフィー / クライオ電子顕微鏡
研究概要

23年度の傾斜角測定の解析において、三次元再構成像(トモグラム)自体を角度値の主たる精度評価に使用しなかったのは、電子線トモグラフィーから得られたトモグラムの精度を客観的に評価するための方法、基準が存在しなかったからである。電子線トモグラフィーが広く使用されるようになったのにもかかわらず、こうした統一基準が存在しないことも重要な理由として、その考案を研究計画に新たに取り入れた。
フォーカスの変化量に応じた倍率変動の評価測定では、表示倍率8万倍(取得画像では、0.22nm/pixに相当)にて-60度から+60度まで試料を傾斜させながらフォーカスを調整したところ、20マイクロメートルのフォーカス変化量が傾斜像シリーズ取得中にあり、これにより約4%程度の倍率変動が起きたことが判明していたが、倍率の見積が撮影画像に依存しているため、つまり、試料そのものに依存しているため、正確な見積方法や、測定時の条件の統一等、再現性に問題があり、信頼ある結果を得るための実験の実現に難航した。
本年度最終目標である相関顕微鏡によるアモルファス氷層試料の観察への取り組みとして、まずはCOS細胞を用いて実験を開始した。細胞の培養状態を保持したままの相関観察は、光学顕微鏡による観察と電子顕微鏡による観察の間にラグタイムがあり、非常に難しいことが、当初予想していた以上であることがわかった。相関実験の当初からアモルファス氷層を用いた観察を行うよりも、弱蛍光だが、蛍光を保持する新しい樹脂包埋方法を使用する方がその操作方法からも、効率的であるという考えに至った。

現在までの達成度 (区分)
理由

24年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

24年度が最終年度であるため、記入しない。

  • 研究成果

    (10件)

すべて 2013 2012 その他

すべて 学会発表 (10件) (うち招待講演 5件)

  • [学会発表] Superimposition of a crystal structure over EM images2013

    • 著者名/発表者名
      松本淳、高木淳一、岩崎憲治
    • 学会等名
      Structural Analysis of Supramolecular Assemblies by Hybrid Methods,KeyStone Symposia Conference,
    • 発表場所
      Granlibakken Resort, Tahoe City,CA,USA.
    • 年月日
      20130303-20130307
  • [学会発表] Atomic model building from low resolution electron microscope images of integrin2013

    • 著者名/発表者名
      松本淳、岩崎憲治、高木淳一
    • 学会等名
      Biophysical Society, 57th Annual Meeting
    • 発表場所
      Philadelphia,USA.
    • 年月日
      20130202-20130206
  • [学会発表] ミドリムシ光センサー器官の細胞内構造2012

    • 著者名/発表者名
      岩崎憲治,宮崎直幸,伊関峰生,長谷川浩司,成田哲博,足立伸一,渡辺正勝
    • 学会等名
      電子顕微鏡機能イメージングの医学・生物学への応用”~高次元機能イメージングの最先端~
    • 発表場所
      岡崎コンファレンスセンター
    • 年月日
      20121024-20121025
  • [学会発表] 製タンパク質の構造からin situの構造まで:電顕を使用して2012

    • 著者名/発表者名
      岩崎憲治
    • 学会等名
      第50回日本生物物理学会年会
    • 発表場所
      名古屋大学
    • 年月日
      20120922-20120924
  • [学会発表] Wnt共受容体LRP6の電子顕微鏡単粒子解析2012

    • 著者名/発表者名
      的場京子,三原恵美子,Samuel Thompson,岩崎憲治,高木淳一
    • 学会等名
      第12回日本蛋白質科学会年会
    • 発表場所
      名古屋国際会議場
    • 年月日
      20120620-20120622
  • [学会発表] CEMOVISの実際2012

    • 著者名/発表者名
      岩崎憲治,宮崎直幸,伊藤喜子,的場京子.
    • 学会等名
      日本顕微鏡学会第68回学術講演会
    • 発表場所
      つくば国際会議場
    • 年月日
      20120514-20120516
    • 招待講演
  • [学会発表] 電顕イメージング:単粒子解析からCEMOVISまで

    • 著者名/発表者名
      岩崎憲治
    • 学会等名
      ワークショップ「高分解能電子顕微鏡イメージング法の生物試料への応用」
    • 発表場所
      奈良先端大学院大学
    • 招待講演
  • [学会発表] EM imaging techniques toward molecular resolution within cellular context

    • 著者名/発表者名
      岩崎憲治
    • 学会等名
      セミナー
    • 発表場所
      沖縄科学技術大学院大学
    • 招待講演
  • [学会発表] In situ molecular analysis by electron microscopy

    • 著者名/発表者名
      岩崎憲治
    • 学会等名
      IPR International Symposium 2012, -Toward the Molecular Comprehension of Life System-
    • 発表場所
      千里阪急ホテル
    • 招待講演
  • [学会発表] 分子分解能電顕イメージング

    • 著者名/発表者名
      岩崎憲治
    • 学会等名
      第二回バイオイメージングセミナー
    • 発表場所
      九工大飯塚キャンパス
    • 招待講演

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公開日: 2014-07-24  

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