抗体医薬の最適化のための無細胞ディスプレイ技術の応用

2012 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 22360351
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 生物機能・バイオプロセス
• 研究機関: 慶應義塾大学
• 研究代表者: 土居 信英 慶應義塾大学, 理工学部, 准教授 (50327673)
• 研究分担者: 柳川 弘志 慶應義塾大学, 理工学部, 訪問教授 (40327672)
• 連携研究者: 松島 綱治 東京大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (50222427) ; 三隅 将吾 熊本大学, 医学薬学研究部, 准教授 (40264311)
• 研究期間 (年度): 2010 – 2012
• キーワード: ウイルス / バイオテクノロジー / 免疫学 / 蛋白質 / 進化

研究概要

本研究では、当研究室で開発されたmRNAディスプレイ法を用いて、ヒト免疫不全ウイルス(HIV)侵入阻害剤の重要な標的となっているCCR5の第2細胞外ループを模倣した環状ペプチドに対して高い親和性を有するヒト化一本鎖抗体の試験管内進化をおこなった。その結果、VL鎖のCDR1に重複した変異をもつ、高親和性変異体が得られた。

研究成果

• [雑誌論文] In vitro selection of Fab fragments by mRNA display and gene-linking emulsion PCR (2012)
  • 著者名/発表者名: Sumida, T., Yanagawa, H., Doi, N
  • 雑誌名: J. Nucleic Acids 巻: 2012 ページ: 371379
  • 査読あり
• [雑誌論文] DNA display selection of peptide ligands for a full-length human G protein-coupled receptor on CHO-K1 cells (2012)
  • 著者名/発表者名: Doi,N.,Yamakawa,N.,Matsumoto,H.,Yamamoto,Y.,Nagano,T.,Matsumura,N.,Horisawa,K.,Yanagawa,H
  • 雑誌名: PLoS ONE 巻: 7 ページ: e30084
  • 査読あり
• [雑誌論文] mRNA display selection of an optimized MDM2-binding peptide that potently inhibits MDM2-p53 interaction (2011)
  • 著者名/発表者名: Shiheido, H., Takashima, H., Doi, N., Yanagawa, H
  • 雑誌名: PLoS ONE 巻: 6 ページ: e17898
  • 査読あり
• [雑誌論文] Comparison of the frequency of functional SH3 domains with different limited sets of amino acids using mRNA display (2011)
  • 著者名/発表者名: Tanaka, J., Yanagawa, H., Doi, N
  • 雑誌名: PLoS ONE 巻: 6 ページ: e18034
  • 査読あり
• [雑誌論文] Comparative characteriza-tion of random-sequence proteins consisting of 5, 12 and 20 kinds of amino acids (2010)
  • 著者名/発表者名: Tanaka, J., Doi, N., Takashima, H., Yanagawa, H
  • 雑誌名: Protein Sci 巻: 19 ページ: 786-795
  • 査読あり
• [雑誌論文] mRNA display selection of a high-affinity, Bcl-XL-specific binding peptide (2010)
  • 著者名/発表者名: Matsumura, N., Tsuji, T., Sumida, T., Kokubo, M., Onimaru, M., Doi, N., Takashima, H., Miyamoto-Sato, E., Yanagawa, H
  • 雑誌名: FASEB J 巻: 24 ページ: 2201-2210
  • 査読あり
• [学会発表] In vitro virus (IVV)法を用いた人工癌幹細胞の接着を阻害する一本鎖抗体の選択 (2012)
  • 著者名/発表者名: 田畠典子, 佐久間裕子, 清水孝恒, 佐谷秀行, 土居信英, 柳川弘志
  • 学会等名: 第35回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 20121200
• [学会発表] 高親和性抗CCR5一本鎖抗体の中立的浮動による試験管内進化 (2011)
  • 著者名/発表者名: 佐藤亮太,土居信英,三隅将吾,庄司省三,松島綱治,横地祥司,柳川弘志
  • 学会等名: 第34回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 20111200
• [学会発表] CD44とxCTの相互作用を阻害する抗CD44v一本鎖抗体の試験管内選択 (2011)
  • 著者名/発表者名: 梅澤洋貴,田畠典子,佐久間裕子,竹中悠馬,松本佳宣,土居信英,永 野 修 ,佐 谷 秀 行 ,柳川弘志
  • 学会等名: 第34回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 20111200
• [学会発表] In vitro display methods for heterodimeric proteins using in vitro compartmentaliza-tion (2010)
  • 著者名/発表者名: Sumida, T., Yanagawa, H., Doi, N
  • 学会等名: Pacifichem 2010
  • 発表場所: Honolulu
  • 年月日: 20101200
• [学会発表] In vitro selection of functional SH3 domains with reduced amino-acid alphabets (2010)
  • 著者名/発表者名: Tanaka, J., Yanagawa, H., Doi, N.
  • 学会等名: Pacifichem 2010
  • 発表場所: Honolulu
  • 年月日: 20101200
• [学会発表] HIV の侵入を阻害する抗 CCR5 一本鎖抗体の試験管内進化 (2010)
  • 著者名/発表者名: 佐藤亮太,土居信英,三隅将吾,松島綱治,横地祥司,柳川弘志
  • 学会等名: 第33回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 20101200
• [図書] 次世代医薬開発に向けた抗体工学の最前線 (2012)
  • 著者名/発表者名: 土居信英
  • 総ページ数: 66-73
  • 出版者: シーエムシー出版
• [図書] 現代生物科学入門9:合成生物学 (2010)
  • 著者名/発表者名: 柳川弘志,土居信英
  • 総ページ数: 1-34
  • 出版者: 岩波書店
• [備考]
  • URL: https://sites.google.com/site/biomoleng12/home