|
前年度、評標的とするAkt結合因子の遺伝子欠損マウスの再作成に着手することとなった。当初私たちがこれまでの研究の中で同定した新規E3リガーゼを標的とする予定で研究を進めた。まず、新規E3リガーゼとAktとの関係について生化学的研究、細胞生物学的な研究を進めた。その結果、新規E3リガーゼにはAkt以外にもユビキチン化としての標的がある可能性があることが判明した。さらに細胞内の細胞死防御の制御の要になっているAkt分子のタンパク分解経路にはユビキチンリガーゼによるプロテアゾーム系のタンパク分解ばかりでなくライソゾーム系のタンパク分解系に関与するさらに重要な結合分子が存在することが判明した。
まずこの分子Aktとの結合に関して、生化学的な検証を進めた。さらに、この分子とAktのライソゾームへの局在と結合に関して蛍光色素を用いて共焦点顕微鏡を用いてその活性化と局在の変化の検証を進めた。解析は現在も遂行中でさらなる検証が必要な段階であるが、Aktのタンパク分解にはユビキチンリガーゼによるプロテアゾーム系のタンパク分解ばかりでなく、ライソゾーム系の関与が深くかかわっていることが示唆される成果が得られている。さらに今後、遺伝子改変マウスによるin vivoでの解析に向けてin vitroでの検証を進める必要性がある。
|
