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2011 年度 実績報告書

人為起源物質分解能をモデルとした環境中での細菌の機能進化を司る分子基盤の解明

研究課題

研究課題/領域番号 22380047
研究機関東北大学

研究代表者

永田 裕二  東北大学, 大学院・生命科学研究科, 准教授 (30237531)

研究分担者 津田 雅孝  東北大学, 大学院・生命科学研究科, 教授 (90172022)
大坪 嘉行  東北大学, 大学院・生命科学研究科, 助教 (40342761)
キーワード環境細菌 / 自然生態系 / 人為起源物質 / 細菌進化 / 微生物機能開発
研究概要

自然環境中に棲息する細菌の多くは既存の手法では培養困難であり、未開拓な微生物機能を従来の微生物学的手法で利用するのは難しい。近年盛んに行われている培養過程を介さないメタゲノム解析も、環境遺伝子の潜在能力は明らかにしているが、現段階では膨大な塩基配列情報を直接「機能」と結び付けることはできない。本研究では、従来の微生物学的手法で扱える培養可能な環境細菌が自然生態系で新規能力を獲得する機構を解明することで、潜在的微生物機能を有効利用するための分子基盤を確立することを目的とする。本年度は、前年度に引き続き「環境細菌」として、全ゲノム情報が判明し分子遺伝学的手法が確立している有機塩素系殺虫剤γ-HCH完全分解資化細菌Sphingobium japonicum UT26株、分解の鍵酵素遺伝子として、UT26株のγ-HCH分解代謝の初期過程に関与する脱ハロゲン酵素LinAとLinBをコードする遺伝子およびそのホモログを主な材料として、研究を進めた。主な成果は以下の通りである。(1)環境中での酵素進化に関する研究として、(i)LinBの構造的ホモログをデータベースの情報から取得し、人工合成した遺伝子を用いて機能解析を行った、(ii)LinB_UTとわずか7アミノ酸残基の違いにもかかわらず、β-HCH分解能が大きく異なるLinB_MIの詳細な解析を実施し、LinB_UTからLinB_MIへの機能進化に関わる知見を得た、(iii)LinBの酵素遺伝子進化の実験的検証を行う系の構築に成功した。(2)環境中での環境細菌のゲノム進化に関する研究として、UT26およびその類縁菌が有するプラスミドや挿入配列などの可動性遺伝因子が、ゲノム進化に重要な役割を果たしていることを強く示唆する知見を得た。(3)環境中での進化機構を利用した新規能力獲得細菌の育種のための基礎的知見を取得した。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

環境中での酵素進化およびゲノム進化に関する重要な基礎的知見の取得に成功し、最終年度に向けて現段階ではおおむね順調に進展していると判断できる。

今後の研究の推進方策

これまでに得た重要な基礎的知見を新規能力獲得細菌の育種という応用面に活かすよう尽力する。

  • 研究成果

    (40件)

すべて 2012 2011

すべて 雑誌論文 (4件) (うち査読あり 4件) 学会発表 (36件)

  • [雑誌論文] Development of a crystallization protocol for the DbeA1 variant of novel haloalkane dehalogenase from Bradyrhizobium elkkani USDA942011

    • 著者名/発表者名
      Prudnikova, T., et al
    • 雑誌名

      Crystal Growth & Design

      巻: 11 ページ: 516-519

    • DOI

      10.1021/cg1013363

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Stereoselectivity and conformational stability of haloalkane dehalogenase DbjA from Bardyrhizobium japonicum USDA110 : the effect of pH and temperature2011

    • 著者名/発表者名
      Chaloupkova, R., et al
    • 雑誌名

      FEBS J

      巻: 278 ページ: 2728-2738

    • DOI

      10.1111/j.1742-4658.2011.08203.x

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Genomic organization and genomic structural rearrangements of Sphingobium japonicum UT26, an archetypal gamma-hexachlorocyclohexane-degrading bacterium2011

    • 著者名/発表者名
      Nagata, Y., et al
    • 雑誌名

      Enzyme and Microbial Technology

      巻: 49 ページ: 499-508

    • DOI

      10.1016/j.enzmictec.2011.10.005

    • 査読あり
  • [雑誌論文] ハロアルカン脱ハロゲン酵素DbjAの鏡像異性体選択性機構の解明2011

    • 著者名/発表者名
      佐藤優花里, ら
    • 雑誌名

      日本結晶学会誌

      巻: 53 ページ: 124-129

    • DOI

      10.5940/jcrsj.53.124

    • 査読あり
  • [学会発表] 微生物ドラフトゲノム配列のフィニッシング用ツール2012

    • 著者名/発表者名
      大坪嘉行, ら
    • 学会等名
      第85回日本細菌学会総会
    • 発表場所
      長崎
    • 年月日
      20120327-20120329
  • [学会発表] Sphingobium sp.MI1205株由来のハロアルカンデハロゲナーゼLinBの立体構造解析2012

    • 著者名/発表者名
      岡井公彦, ら
    • 学会等名
      日本農芸化学会2012年度大会
    • 発表場所
      京都・京都女子大学
    • 年月日
      20120323-20120326
  • [学会発表] フィニッシング用のツールGenoFinisherの開発2012

    • 著者名/発表者名
      大坪嘉行, ら
    • 学会等名
      日本農芸化学会2012年度大会
    • 発表場所
      京都・京都女子大学
    • 年月日
      20120323-20120326
  • [学会発表] 芳香族化合物汚染土壌における経時的メタゲノムによって明らかになった土壌微生物の適応反応2012

    • 著者名/発表者名
      加藤広海, ら
    • 学会等名
      日本農芸化学会2012年度大会
    • 発表場所
      京都・京都女子大学
    • 年月日
      20120323-20120326
  • [学会発表] 土壌細菌Burkholderia multivorans ATCC 17616株の鉄応答転写因子Furと過酸化水素応答転写因子OxyRの各種表現型への関与2012

    • 著者名/発表者名
      木村明音, ら
    • 学会等名
      日本農芸化学会2012年度大会
    • 発表場所
      京都・京都女子大学
    • 年月日
      20120323-20120326
  • [学会発表] ナフタレン分解プラスミドNAH7の接合伝達関連遺伝子群のsingle cellレベルでの発現解析2012

    • 著者名/発表者名
      井上慧, ら
    • 学会等名
      日本農芸化学会2012年度大会
    • 発表場所
      京都・京都女子大学
    • 年月日
      20120323-20120326
  • [学会発表] 培養非依存的手法による土壌からの新規芳香族化合物分解遺伝子の探索2012

    • 著者名/発表者名
      永山浩史, ら
    • 学会等名
      日本農芸化学会2012年度大会
    • 発表場所
      京都・京都女子大学
    • 年月日
      20120323-20120326
  • [学会発表] Sphingobium sp.MI1205株由来のハロアルカンデハロゲナーゼLinB_MIにおけるbeta-HCH分解活性に重要なアミノ酸残基の同定2012

    • 著者名/発表者名
      森内良太, ら
    • 学会等名
      日本農芸化学会2012年度大会
    • 発表場所
      京都・京都女子大学
    • 年月日
      20120323-20120326
  • [学会発表] IncP-7群プラスミドの接合伝達宿主域を規定する因子の探索2012

    • 著者名/発表者名
      瀬谷学人, ら
    • 学会等名
      日本農芸化学会2012年度大会
    • 発表場所
      京都・京都女子大学
    • 年月日
      20120323-20120326
  • [学会発表] ゲノム情報を利用した多様な細菌由来のハロアルカンデハロゲナーゼの解析2012

    • 著者名/発表者名
      田中裕興, ら
    • 学会等名
      日本農芸化学会2012年度大会
    • 発表場所
      京都・京都女子大学
    • 年月日
      20120323-20120326
  • [学会発表] 有機塩素系殺虫剤gamma-HCH分解細菌Sphingobium japonicum UT26株の炭素源非添加無機寒天培地上で生育する突然変異株の遺伝学的解析2012

    • 著者名/発表者名
      平野丈, ら
    • 学会等名
      日本農芸化学会2012年度大会
    • 発表場所
      京都・京都女子大学
    • 年月日
      20120323-20120326
  • [学会発表] STM法で同定した土壌細菌Burkholderia multivorans ATCC 17616株の土壌環境下での生残に重要な遺伝子の解析2012

    • 著者名/発表者名
      石橋蓉子, ら
    • 学会等名
      日本農芸化学会2012年度大会
    • 発表場所
      京都・京都女子大学
    • 年月日
      20120323-20120326
  • [学会発表] 環境汚染物質分解能を担うプラスミドの水平伝達2012

    • 著者名/発表者名
      津田雅孝, ら
    • 学会等名
      日本農芸化学会2012年度大会シンポジウム
    • 発表場所
      京都・京都女子大学
    • 年月日
      20120323-20120326
  • [学会発表] 土壌攪乱に対し同調して動く遺伝子群の解析2012

    • 著者名/発表者名
      加藤広海, ら
    • 学会等名
      第6回日本ゲノム微生物学会年会
    • 発表場所
      東京・立教大学
    • 年月日
      20120310-20120312
  • [学会発表] 土壌細菌群集団の移植と芳香族化合物による汚染化の変動解析2012

    • 著者名/発表者名
      永山浩史, ら
    • 学会等名
      第6回日本ゲノム微生物学会年会
    • 発表場所
      東京・立教大学
    • 年月日
      20120310-20120312
  • [学会発表] GenoFinisherを用いたPseudomonas sp.CF600ゲノムの完全配列決定2012

    • 著者名/発表者名
      奥野周, ら
    • 学会等名
      第6回日本ゲノム微生物学会年会
    • 発表場所
      東京・立教大学
    • 年月日
      20120310-20120312
  • [学会発表] 有機塩素系殺虫剤gamma-hexachlorocyclohexane分解能を有するSphingobium sp.TKS株のゲノム解析2012

    • 著者名/発表者名
      大畑智史, ら
    • 学会等名
      第6回日本ゲノム微生物学会年会
    • 発表場所
      東京・立教大学
    • 年月日
      20120310-20120312
  • [学会発表] Burkholderia multivorans ATCC 17616株ゲノムからSTM法で選抜した土壌環境下での生残関与候補遺伝子の解析2012

    • 著者名/発表者名
      石橋蓉子, ら
    • 学会等名
      第6回日本ゲノム微生物学会年会
    • 発表場所
      東京・立教大学
    • 年月日
      20120310-20120312
  • [学会発表] Direct isolation and characterization of genes for degradation of aromatic compounds from soils that were artificially contaminated with aromatic pollutants2011

    • 著者名/発表者名
      Hirofumi Nagayama, ら
    • 学会等名
      International Forum for Ecosystem Adaptability Science III-Adaptability of Human Societies to Perturbation
    • 発表場所
      Sendai, Japan
    • 年月日
      20111116-20111118
  • [学会発表] Fluctuation pattern of gene pools of microbiota in aromatic hydrocarbon-contaminated soil by sequential metagenomic analysis2011

    • 著者名/発表者名
      Hiromi Kato, et al
    • 学会等名
      International Union of Microbiological Societies 2011 Congress
    • 発表場所
      Sapporo, Japan
    • 年月日
      20110906-20110910
  • [学会発表] Nitrogen-related phosphotransferase system of Pseudomonas putida KT2440 exerts negative effect on conjugative acquisition of naphthalene-catabolic plasmid NAH72011

    • 著者名/発表者名
      Kei Inoue, et al
    • 学会等名
      International Union of Microbiological Societies 2011 Congress
    • 発表場所
      Sapporo, Japan
    • 年月日
      20110906-20110910
  • [学会発表] Alleviation of nitric oxide sensitivity of Burkholderia multivorans ATCC 17616 fur mutant by additional mutation in oxyR gene2011

    • 著者名/発表者名
      Akane Kimura, et al
    • 学会等名
      International Union of Microbiological Societies 2011 Congress
    • 発表場所
      Sapporo, Japan
    • 年月日
      20110906-20110910
  • [学会発表] Structural analysis of plasmids for gamma-hexachlorocyclohexane degradation in Sphingomonas sp.MM-12011

    • 著者名/発表者名
      Michiro Tabata, et al
    • 学会等名
      International Union of Microbiological Societies 2011 Congress
    • 発表場所
      Sapporo, Japan
    • 年月日
      20110906-20110910
  • [学会発表] Development of a computational tool for finishing of draft genomic sequence2011

    • 著者名/発表者名
      Yoshiyuki Ohtsubo, et al
    • 学会等名
      International Union of Microbiological Societies 2011 Congress
    • 発表場所
      Sapporo, Japan
    • 年月日
      20110906-20110910
  • [学会発表] 残留性有機汚染物質(POPs)分解酵素遺伝子を導入したカボチャ毛状根によるヘキサクロロシクロヘキサン分解能の解析2011

    • 著者名/発表者名
      七里吉彦, ら
    • 学会等名
      第29回日本植物細胞分子生物学会大会
    • 発表場所
      福岡・九州大学
    • 年月日
      20110906-20110908
  • [学会発表] Sphingobium sp.MI1205株由来の脱ハロゲン酵素LinB_MI特異的なbeta-HCH分解活性に重要なアミノ酸残基の同定2011

    • 著者名/発表者名
      森内良太, ら
    • 学会等名
      日本ゲノム微生物学会ワークショップ
    • 発表場所
      仙台・東北大学
    • 年月日
      20110820-20110821
  • [学会発表] ナフタレン分解プラスミドNAH7の接合伝達制御に関与する受容菌のリン酸基転移系2011

    • 著者名/発表者名
      井上慧, ら
    • 学会等名
      日本ゲノム微生物学会ワークショップ
    • 発表場所
      仙台・東北大学
    • 年月日
      20110820-20110821
  • [学会発表] 土壌細菌Burkholderia multivorans ATCC 17616株のfur破壊株のROS/NOS高感受性とoxyR欠失による表現型回復機構2011

    • 著者名/発表者名
      木村明音, ら
    • 学会等名
      日本ゲノム微生物学会ワークショップ
    • 発表場所
      仙台・東北大学
    • 年月日
      20110820-20110821
  • [学会発表] 有機塩素系殺虫剤gamma-hexachlorocyclohexane分解細菌Sphingomonas sp.MM-1株が保持する分解関連プラスミドの塩基配列解析と機能解析2011

    • 著者名/発表者名
      田端理朗, ら
    • 学会等名
      日本ゲノム微生物学会ワークショップ
    • 発表場所
      仙台・東北大学
    • 年月日
      20110820-20110821
  • [学会発表] 土壌細菌Burkholderia multivorans ATCC 17616株の土壌環境特異的発現遺伝子の解析2011

    • 著者名/発表者名
      三浦那智, ら
    • 学会等名
      日本ゲノム微生物学会ワークショップ
    • 発表場所
      仙台・東北大学
    • 年月日
      20110820-20110821
  • [学会発表] 土壌メタゲノムから見る,芳香族化合物汚染により誘導される微生物群集の反応2011

    • 著者名/発表者名
      加藤広海, ら
    • 学会等名
      日本ゲノム微生物学会ワークショップ
    • 発表場所
      仙台・東北大学
    • 年月日
      20110820-20110821
  • [学会発表] 芳香族化合物複合汚染土壌由来のメタゲノムライブラリからの機能相補による新規リダクターゼ遺伝子の探索2011

    • 著者名/発表者名
      永山浩史, ら
    • 学会等名
      日本ゲノム微生物学会ワークショップ
    • 発表場所
      仙台・東北大学
    • 年月日
      20110820-20110821
  • [学会発表] Sphingobium sp.MI1205株由来のハロアルカンデハロゲナーゼLinB_MI特異的なbeta-HCH分解活性に重要なアミノ酸残基の同定2011

    • 著者名/発表者名
      森内良太, ら
    • 学会等名
      環境バイオテクノロジー学会2011年度大会
    • 発表場所
      東京・東京大学
    • 年月日
      20110620-20110621
  • [学会発表] 土壌細菌Burkholderia multivorans ATCC 17616株の土壌特異的発現遺伝子の解析2011

    • 著者名/発表者名
      三浦那智, ら
    • 学会等名
      環境バイオテクノロジー学会2011年度大会
    • 発表場所
      東京・東京大学
    • 年月日
      20110620-20110621
  • [学会発表] Structural insight into the catalytic mechanism of enzyme for bioremediation2011

    • 著者名/発表者名
      Masaru Tanokura, et al
    • 学会等名
      BIT Life Sciences' 2^<nd> Symposium on Enzymes and Biocatalysis
    • 発表場所
      Dalian, China
    • 年月日
      20110425-20110430
  • [学会発表] Molecular bases of enatioselectivity of haloalkane dehalogenase DbjA2011

    • 著者名/発表者名
      Yukari Sato, et al
    • 学会等名
      BIT Life Sciences' 2^<nd> Symposium on Enzymes and Biocatalysis
    • 発表場所
      Dalian, China
    • 年月日
      20110425-20110430

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公開日: 2013-06-26  

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